氢水通过上调 NFE2L2/HMOX1 表达抑制顺铂致肝细胞损伤作用研究 后印本

摘要: 背景  顺铂诱导的药物性肝损伤是肿瘤化疗常见的不良反应，严重影响了患者临床治疗。氢作为一种选择性抗氧化剂，在多种损伤相关的疾病中均具有良好的辅助治疗作用，但其在顺铂诱导的肝损伤中的预防作用及其机制尚未明确。目的  探讨氢水对顺铂致肝细胞氧化应激性损伤的保护作用及作用机制。方法  于 2022 年 6 月—2023 年 6 月取人正常肝细胞株 WRL68 分为对照组、顺铂组、氢水组、氢水 + 顺铂组。对照组采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基培养 48 h；顺铂组采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基培养 24 h 后，加入 3 μg/mL 顺铂继续培养 24 h；氢水组采用 0.6 mg/L 氢水培养基培养 48 h；氢水 + 顺铂组采用 0.6 mg/L 氢水培养基培养 24 h 后，加入3 μg/mL 顺铂继续培养 24 h。收集各组细胞，采用 CCK-8 法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡率，罗丹明 123荧光探针染色法检测粒体膜电位（MMP），DCFH-DA 荧光探针染色法检测细胞内活性氧（ROS），Western blot 和RT-qPCR 检测细胞内核因子红细胞 2 相关因子 2（NFE2L2）、血红素加氧酶 1（HMOX1）蛋白及 mRNA 表达水平。结果  与对照组相比，顺铂组 WRL68 细胞凋亡率、ROS 水平升高（P<0.05），MMP 水平及 NFE2L2、HMOX1 的蛋白及 mRNA 水平降低（P<0.05）；氢水组 WRL68 细胞凋亡率、ROS 水平与对照组相比，差异均无统计学意义（P>0.05）；氢水组 MMP 水平及 NFE2L2、HMOX1 的蛋白及 mRNA 水平均高于对照组（P<0.05）。与顺铂组相比，氢水 + 顺铂组WRL68细胞凋亡率、ROS水平均降低（P<0.05），MMP水平及NFE2L2、HMOX1的蛋白及 mRNA表达水平均升高（P<0.05）。结论  氢水可通过激活NFE2L2/HMOX1信号通路，提高线粒体膜电位，抑制顺铂引起的肝细胞氧化应激性损伤，从而减轻药物性肝损伤。