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人甲状旁腺激素(1-34)在人成骨肉瘤细胞中对基质Gla蛋白及Wnt/β-catenin信号通路的调节作用

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摘要: 目的 观察人甲状旁腺激素(PTH)的N端活性片段PTH(1-34)对人成骨肉瘤细胞MG63基质Gla蛋白(MGP)表达的影响,以及PTH通过Wnt/β-catenin信号通路介导MGP表达调控的作用,探讨PTH(1-34)在防治骨质疏松症作用中可能的分子机制。方法(1)用不同浓度PTH(1-34)(10-9、10-8、10-7 mol/L),单独或联合Wnt/β-catenin信号通路抑制剂DKK-1(200 ng/mL)干预MG63细胞;(2)检测碱性磷酸酶(ALP)染色及活力测定用于判断细胞分化情况;(3)MGP及Wnt/β-catenin信号通路各组分的 mRNA及蛋白的表达分别采用实时定量 RT-PCR及 Western blotting方法。结果 (1)PTH(1-34)上调 MGP基因的表达,MGP mRNA的表达分别是对照组的 2.56倍、4.14倍、7.81倍(P<0.05 或 P<0.01),且呈剂量依赖性增高;(2)PTH增强 MG63细胞 ALP活力,Dkk-1抑制 ALP活性,Dkk-1与 PTH联用部分阻断 PTH上调 ALP活力(P<0.05);(3)PTH上调 MGP及 Wnt/β-catenin信号通路中相关因子 LRP5、β-catenin、Runx2 mRNA及蛋白水平,其 mRNA分别是对照组的 2.65、4.01、3.48倍(P<0.05或<0.01);DKK-1对PTH(1-34)促MGP表达没有影响,但大部分阻断了Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达。结论 PTH(1-34)能明显上调MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达,Wnt/β-catenin信号通路和MGP在PTH调节骨代谢中起重要作用。

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[V1] 2017-12-27 12:40:28 ChinaXiv:201712.00910V1 下载全文
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