分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《分子影像学杂志》
摘要： 目的 探讨CNE1对人鼻咽癌细胞系CNE1凋亡的影响。方法 利用阳离子脂质体Lipofectamine TM2000将HIF-1αsi RNA转染入CNE13细胞中。WB法测定CNE1细胞内HIF-1α的表达。流式细胞仪及Hochest荧光染色测定细胞凋亡率的变化。WB 法测定 CNE1 细胞内 BCL-2 的表达。结果 干扰 HIF-1α能有效地促进 CNE1 细胞的凋亡，同时可下调 BCL-2 的表达。 结论 体外实验初步证明HIF-1α基因在人鼻咽癌细胞系CNE1凋亡方面扮演重要角色，可通过下调BCL-2的表达来诱导凋亡。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验通过建立过氧化氢(H2O2)诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡模型，研究谷氨酰胺（Gln）、甘氨酰谷氨酰胺（Gly-Gln）和丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）对凋亡细胞的凋亡率及Bcl-2、Bax基因表达量的影响。选用60日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮传代细胞，采用不同浓度[0(对照组)、100、400、800 µmol/L]的H2O2培养细胞，应用流式细胞术检测细胞凋亡情况。传代瘤胃上皮细胞分为5组，对照组和1组分别添加0、800 µmol/L H2O2，2组、3组、4组均添加800 µmol/L H2O2，同时分别添加17.28 mmol/L Gly-Gln（2组）、16.0 mmol/L Gln（3组）、16.0 mmol/L Ala-Gln（4组），应用流式细胞术检测细胞凋亡情况，同时采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测细胞Bcl-2、Bax基因表达量。结果显示：1）与对照组相比，当H2O2浓度增加到800 µmol/L时，早期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），而晚期凋亡的凋亡率随着H2O2浓度的增加呈现增加后减少的趋势，但相对于对照组，都呈显著增加（P＜0.05）。2）与对照组相比，4组晚期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），试验组早期凋亡的凋亡率均显著增加（P＜0.05）。3）与对照组相比，试验组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05）；与1组相比，2组、3组和4组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05），且2组显著高于3组、4组（P＜0.05）。综合得出，Gly-Gln对H2O2引起山羊瘤胃上皮细胞早期凋亡具有一定的保护作用。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验通过建立过氧化氢(H2O2)诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡模型，研究谷氨酰胺（Gln）、甘氨酰谷氨酰胺（Gly-Gln）和丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）对凋亡细胞的凋亡率及Bcl-2、Bax基因表达量的影响。选用60日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮传代细胞，采用不同浓度[0(对照组)、100、400、800 µmol/L]的H2O2培养细胞，应用流式细胞术检测细胞凋亡情况。传代瘤胃上皮细胞分为5组，对照组和1组分别添加0、800 µmol/L H2O2，2组、3组、4组均添加800 µmol/L H2O2，同时分别添加17.28 mmol/L Gly-Gln（2组）、16.0 mmol/L Gln（3组）、16.0 mmol/L Ala-Gln（4组），应用流式细胞术检测细胞凋亡情况，同时采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测细胞Bcl-2、Bax基因表达量。结果显示：1）与对照组相比，当H2O2浓度增加到800 µmol/L时，早期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），而晚期凋亡的凋亡率随着H2O2浓度的增加呈现增加后减少的趋势，但相对于对照组，都呈显著增加（P＜0.05）。2）与对照组相比，4组晚期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），试验组早期凋亡的凋亡率均显著增加（P＜0.05）。3）与对照组相比，试验组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05）；与1组相比，2组、3组和4组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05），且2组显著高于3组、4组（P＜0.05）。综合得出，Gly-Gln对H2O2引起山羊瘤胃上皮细胞早期凋亡具有一定的保护作用。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-11-25 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：本文旨在探讨糖酵解酶丙酮酸激酶M2型（PKM2）对人白血病细胞体外增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法：将靶向PKM2的慢病毒载体转染人K562细胞株（shPKM2组），同时设立空载体转染组为对照（Vector组）。采用qRT-PCR和Western blot技术分别检测Vector组和shPKM2组PKM2 mRNA和蛋白的表达以及自噬标志物的变化；CCK-8实验检测细胞体外增殖能力；流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况；Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果：在稳定干扰PKM2后，PKM2的mRNA（t=11.58，P=0.0003）和蛋白水平（t=11.88，P=0.0003）均明显降低。与Vector组比较，shPKM2组细胞体外增殖能力显著降低（F=118.87，P＜0.0001）。同时，干扰PKM2可使K562细胞周期阻滞在G1期，细胞凋亡率显著增加（t=37.23，P＜0.0001）；使促凋亡蛋白Bax表达增加（t=15.36，P=0.0001）、抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低（t=9.965，P=0.0006）。此外，干扰PKM2可减弱K562细胞自噬水平，表现为LC3II降低（tLC3II=10.32，PLC3II=0.0005），而p62水平增加（tp62=14.59，Pp62=0.0001）。还发现自噬诱导剂能逆转shPKM2引起的白血病细胞体外增殖能力减弱（F=96.32，P＜0.0001）。结论：以上结果表明干扰PKM2可抑制人白血病K562细胞的体外增殖并促进其凋亡，其机制可能与PKM2介导的自噬活性降低有关，提示PKM2可能作为白血病诊疗的一个潜在靶点。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的为研究人肝癌细胞系HepG2线粒体DNA ( mtDNA)缺失后的放射生物学特性，建立并鉴定mtDNA缺失HepG2(p0HepG2)细胞系。测定辐射干预下mtDNA缺失(CRh00)肝癌细胞的凋亡情况、侵袭能力以及辐射敏感性的变化。方法在含有嗅化乙锭(EB)、丙酮酸、尿嚓陡的特殊培养基中培养HepG2细胞，经30次传代后，有限稀释法筛选完全去除mtDNA的克隆。去除丙酮酸及尿嚓陡后，观察细胞的存活情况。PCR法鉴定mtDNA的缺失。用6MvX射线梯度剂量照射HepG2细胞和p0HepG2细胞，平板克隆法绘制生长曲线，线性二次方程拟合生存曲线，计算α/β。2Gy剂量辐射细胞，24 h后用Hochest33342细胞核染色，比较HepG2细胞与p0HepG2凋亡率的差异。用Transwell法测定两种不同细胞的侵袭能力。结果在含EB特殊培养环境下，HepG2细胞可持续生长传代至30代，去除丙酮酸和尿嚓陡后，细胞短时间内大量死亡。经PCR法证实mtDNA完全缺失。p0HepG2细胞a/p显著低于正常HepG2细胞，辐射抵抗能力增强。辐射干预后p0HepG2的凋亡比例显著减少。p0HepG2穿膜细胞数显著增多。结论在EB长期诱导下，HepG2肝癌细胞可被成功诱导为mtDNA缺失细胞。p0HepG2细胞的辐射抵抗性显著增强，抗凋亡能力及侵袭能力均提高。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 探讨石蒜碱对肾癌细胞ACHN的作用及可能机制。方法 流式细胞仪分析石蒜碱对ACHN细胞周期及凋亡的影响；MTS检测石蒜碱对ACHN细胞增殖的作用；划痕实验、Transwell实验检测石蒜碱对ACHN细胞迁移、侵袭能力的影响；平板克隆形成检测石蒜碱对ACHN细胞集落形成能力的影响；qRT-PCR分析基因转录的变化；Western blotting分析蛋白表达水平的变化。结果 石蒜碱对 ACHN半数抑制浓度为 24.34 μmol/L。石蒜碱能将肾癌 ACHN细胞剂量依赖性阻滞于 G0/G1期（P<0.01）；与正常对照组相比，5 μmol/L石蒜碱即能诱导ACHN细胞凋亡（P<0.01）、抑制ACHN细胞增殖（P<0.01）；处理后ACHN细胞迁移能力（P<0.01）、侵袭能力（P<0.01）显著下降、集落形成能力亦呈剂量依赖性降低。qRT-PCR及 Western blotting显示 5 μmol/L的石蒜碱即能在基因及蛋白水平上调CDK4、Bax表达，而下调CyclinD1、Bcl-2、Survivin的表达；caspase-3基因表达增加，caspase-3蛋白水平变化却不甚明显。结论 石蒜碱对肾癌ACHN细胞具有明显的抗肿瘤效应，该药可为肾癌的治疗提供新思路。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：在肺癌细胞中沉默PHP14，并研究其对肺癌细胞凋亡的影响及其可能机制。方法：利用shRNA稳定沉默肺癌细胞株A549中PHP14的表达，并利用Annexin V、PI双染和流式细胞仪检测细胞在正常培养条件下和凋亡诱导条件下的凋亡情况；通过皮下接种裸鼠，探讨PHP14沉默对肺癌细胞体内成瘤的影响，并利用Realtime-PCR和Western blotting检测PHP14沉默后凋亡相关基因的表达情况。结果：成功获得了PHP14稳定沉默的肺癌细胞株，发现PHP14沉默可促进肺癌细胞诱导性凋亡，并抑制肺癌细胞的体内成瘤能力，并且发现PHP14沉默对肺癌细胞凋亡的影响可能是通过抑制Bcl-2表达实现的。结论：PHP14沉默可促进肺癌细胞诱导性凋亡，并可能通过抑制Bcl-2影响肺癌细胞凋亡。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因，观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法 根据斯丹赛FastTALE TM TALEN试剂盒说明书，设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性，成功挑取MYH9基因敲低单克隆株，并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果 成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除；MYH9基因敲低后，MGC803细胞周期受阻于G2/M期（P<0.05），早期凋亡增加（P<0.05）。结论 利用TALEN技术成功构建MGC803细胞MYH9基因敲低单克隆株，该模型有助于后期深入探讨胃癌MYH9基因功能。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 探讨β-榄香烯对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）、流式细胞术检测细胞凋亡、周期分布和平板克隆形成实验检测β-榄香烯对SGC7901胃癌细胞的影响，同时评价β-榄香烯对正常胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用；通过Western blots检测β-榄香烯对SGC7901胃癌细胞的蛋白表达影响。结果 β-榄香烯显著抑制SGC7901胃癌细胞的活性并诱导细胞凋亡，两种作用在正常胃黏膜上皮细胞GES-1中明显减弱。β-榄香烯降低SGC7901胃癌细胞克隆形成率，诱导SGC7901细胞发生G2/M期阻滞。β-榄香烯降低了SGC7901胃癌细胞Bcl-2蛋白表达水平，增加了Bax和活化的Caspase-3（17Kd）表达水平。β-榄香烯对SGC7901胃癌细胞Pak1（p21-activated protein kinase 1）的总蛋白表达无明显影响，但降低了Pak1（Thr423）和ERK1/2（Extracellular signal-Regulated Kinase 1/2）的磷酸化水平。结论 β-榄香烯抑制胃癌细胞增殖，诱导胃癌细胞凋亡，其可能的分子机制为抑制Pak1/ERK信号通路的活化、调控Bcl-2和Bax等凋亡相关蛋白表达。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的研究17-AAG联合紫杉醇(PTx)对食管癌细胞Eca-109增殖和凋亡的影响。方法予以PTX和17-AAG单独或联合使用作用于Eca-109细胞株，采用MTT法检测其细胞增殖的变化，应用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡的变化。结果与对照组相比，单独使用17-AAG ,PTX均能够抑制Eca-109细胞的增殖;0.5μmol/L PTX联合0.625μmol/L 17-AAG可抑制Eca-109的生长，且联合效应明显强于各自单药组(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示:17-AAG将Eca-109细胞阻滞于G2/M期，PTX将Eca-109细胞阻滞于S期。17-AAG与PTX联合用药使Eca-109细胞阻滞于G2/M期和S。17-AAG组、PTX组及联合组作用Eca-109细胞株24 h后其凋亡率分别为4.52% ,10.91 % ,29.88%，显著高于对照组(1.32% );联合用药后，可形成明显凋亡峰，明显高于单药组。结论PTX和17-AAG均可抑制食管癌细胞增殖，诱导癌细胞凋亡，两者联合可增强上述作用。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的研究硫利达嗪对结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响。方法应用5-30 wmol/L硫利达嗪处理S W480细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33342细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期;RT-qPCR分析PDCD4 , c-MYC , B CL2, CCND1, CASPASE3 ,PARP1, CDK4 ,EIF4A基因表达水平;Western blotting检测AKT, p-AKT ,PDCD4蛋白表达水平。结果MTT结果表明硫利达嗪抑制S W480细胞的增殖，硫利达嗪处理细胞后出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征;流式检测表明硫利达嗪诱导Go/G,期阻滞，细胞凋亡增加。RT-PCR结果表明硫利达嗪处理细胞后PDCD4表达上调，CCND1,CDK4,c-MYC,BCL2,CASPASE3,PARP1和EIF4A表达下调。免疫印迹分析结果显示PDCD4蛋白表达上调，p-AKT蛋白表达下调。结论硫利达嗪能够抑制人结肠癌SW480细胞的增殖，并诱导其凋亡，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路导致PDCD4表达水平升高有关。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的观察丙戊酸钠对阿霉素体外抗乳腺癌Hs578T细胞作用的影响。方法Western blot检测缝隙连接蛋白Cx43的表达;MTT法检测阿霉素的细胞毒性;Annexin V/PI双染法观察阿霉素对细胞早期凋亡的影响;Hochest 33258荧光染色法检测阿霉素对细胞晚期凋亡的影响。结果Western blot结果显示丙戊酸钠可以显著增强缝隙连接蛋白Cx43的表达(P<0.01) ; MTT结果表明在细胞间缝隙连接功能形成的条件下，丙戊酸钠联用阿霉素组的细胞存活率显著低于阿霉素组(P<0.01) ; Annexin V/PI双染法显示丙戊酸钠联用阿霉素组的细胞早期凋亡率显著高于阿霉素组(P<0.01) ; Hochest 33258荧光染色结果显示丙戊酸钠联用阿霉素组的细胞晚期凋亡率显著高于单用阿霉素组(P<0.01)。结论丙戊酸钠可显著增强阿霉素的细胞毒性及其诱导的细胞凋亡作用，其机制可能与增强缝隙连接通讯功能有关。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 研究STOML-2过表达抑制人宫颈鳞癌Siha细胞凋亡的机制，以期为宫颈癌的治疗开辟新的路径。方法 用携带STOML-2基因的腺病毒感染Siha细胞作为过表达组，同时设立空白载体组及空白组作为对照，72 h后用Western blot检测STOML-2的过表达，并用MTT法检测STOML-2过表达对细胞增殖的影响。用IC50 的顺铂处理各组细胞24 h后，利用荧光显微镜观察STOML-2过表达对细胞凋亡的影响，并利用流式细胞仪进一步分析细胞的凋亡率；采用Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白caspase3、cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax以及线粒体内外细胞色素C（Cyt C）表达量的变化。结果 与空白组及空白载体组相比，Western blot结果显示过表达组STOML-2的表达量明显增加；MTT结果显示，STOML-2过表达后可明显促进Siha细胞的增殖。用IC 50 的顺铂处理细胞24 h后，荧光显微镜下，空白载体组凋亡细胞的细胞核大小不一，浓染致密的蓝色荧光显示核固缩，部分核裂解为凋亡小体，而过表达组细胞核多较完整，着色较浅，染色质密度均匀一致，并且流式细胞仪结果同样提示STOML-2过表达后细胞凋亡率明显降低。Western blot结果显示过表达组线粒体凋亡途径相关蛋白cleaved-caspase3、Bax以及线粒体外Cyt C表达水平降低，而caspase3、Bcl-2及线粒体内Cyt C的表达水平则相应升高。结论 STOML-2过表达可以促进Siha细胞增殖，其抑制凋亡的机制可能与线粒体凋亡途径相关。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的检测结肠癌细胞系中miR-200a对高转移细胞系Lovo的影响。方法采用荧光定量PCR法检测6种结肠癌细胞系HCT116,HT29, LS174T,SW480,SW620和Lovo中miR-200a的表达水平，在高转移细胞系Lovo中瞬时转染miR-200a mimics使其高表达miR-200a，检测高表达miR-200a后Lovo细胞增殖、迁移、细胞同质豁附能力和凋亡等情况的变化。结果miR-200a在6种细胞系中存在差异性表达，其中具有高转移潜能的Lovo中表达最低，成瘤但不转移的细胞系HCT116表达最高。在Lovo细胞高表达miR-200a后，Lovo细胞的增殖和迁移能力明显减弱、细胞同质豁附能力增强且凋亡增加。结论miR-200a在结肠癌细胞系中表达失常，其作用可能与结肠癌细胞的侵袭和转移有关，高表达miR-200a能抑制Lovo细胞增殖和迁移、增强细胞间豁附能力、促进凋亡，其分子机制有待进一步研究。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究热应激时乳蛋白含量和产量降低与泌乳相关激素、乳蛋白合成相关信号通路及乳腺细胞凋亡的关系，并揭示热应激引起乳蛋白含量和产量下降的原因。选取4头泌乳日龄、体重、产奶量相近的经产健康荷斯坦奶牛作为试验动物。采取2×2交叉试验设计，试验共2期，每期18 d（其中预试期和试验期各9 d），2期之间间隔30 d。预试期为热中性环境，自由采食。试验期奶牛随机分为2组(n=2)，分别为热应激组和配对限饲组。结果表明：1）热应激极显著降低了乳蛋白的含量和产量（P0.05）。3）热应激显著增加了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路中的mTOR的基因表达量（P<0.05），且有增加核糖体S6蛋白激酶(S6K1)基因表达量的趋势（0.05≤P<0.10）。4）热应激增加了乳腺细胞中与细胞凋亡相关的半胱氨酸蛋白酶3（CASP3）、环氧合酶-2（COX2）基因的表达量（P<0.05），且有增加B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（BAX）基因表达量的趋势（0.05≤P<0.10）。综合可知，热应激可能并不是通过调控单个乳腺细胞合成乳蛋白的能力来影响乳蛋白的含量和产量，而是通过诱导乳腺细胞的凋亡，减少可用于乳蛋白合成的乳腺细胞的数量来影响的。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 热应激是一种常见的非特异性应激，给畜牧业带来较大的损失。肠道组织在热应激作用下易发生缺血缺氧，肠道细胞产生氧化应激，造成细胞凋亡，引起肠道组织损伤。而肠道作为动物机体吸收营养、屏障病原体最为重要的器官，当其受到损伤时将直接影响到动物机体的生长发育及健康状况。本文从热应激诱导肠道细胞产生氧化应激，氧化应激对肠道的损伤，以及热应激诱导细胞凋亡途径等方面，结合国内外近年来研究进展作一综述。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本研究以IPEC-J2细胞为材料，研究不同浓度和时间处理下呕吐毒素（DON）对猪空肠上皮细胞凋亡的影响。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖毒性，筛选出合适的DON作用时间（6、12、24 h）。通过低浓度（200 ng/mL）和高浓度（2 000 ng/mL）DON分别作用IPEC-J2细胞6、12、24 h，检测DON对细胞有丝分裂周期和细胞早期凋亡的影响。结果表明：1）DON对IPEC-J2细胞生长有明显抑制作用，200和2 000 ng/mL DON浓度下，48和72 h的细胞存活率显著低于24 h(P<0.05)；2 000 ng/mL DON浓度下，72 h的细胞存活率显著低于48 h(P<0.05)。2）不同DON浓度对细胞周期影响不同，低浓度DON主要作用于细胞有丝分裂S期，干扰DNA的复制；而高浓度DON主要作用于细胞有丝分裂G2/M期，干扰有关酶与纺锤丝蛋白质的合成。3）DON作用6 h，低浓度DON组和高浓度DON组早期凋亡率和总凋亡率显著高于对照组(P<0.05)；DON作用12 h，高浓度DON组早期凋亡率和总凋亡率显著高于对照组和低浓度DON组(P<0.05)。由此可见，DON抑制了IPEC-J2细胞增殖，低浓度DON使细胞有丝分裂停留在S期，高浓度DON使细胞有丝分裂停留在G2/M期。DON促使细胞早期凋亡，使总凋亡率上升，且促凋亡作用随DON浓度升高而增强
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 观察甲状旁腺激素的非依赖PLC的PKC转导通路（PTH/nonPLC/PKC）是否会对成骨细胞（MC3T3-E1）的凋亡以及细胞数量具有影响。方法 培养MC3T3-E1细胞，以1.5×104密度接种到96孔板，然后置于培养箱培养3 d直到细胞达到汇合状态，随机分为5组：按 100 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH（1-28）；100 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）；100 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）+1 μmol/L Go6983，1 μmol/L Go6983；空白对照组加入等体积的去离子水，分别刺激细胞1、24、48 h，然后使用细胞计数试剂盒（CCK-8）和Caspase-Glo® 3/7试剂盒（caspase-3）检测细胞的细胞数量与凋亡。结果 CCK-8检测结果显示，［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）+Go6983组相比，在1 h和24 h具有提高细胞数量的趋势，但结果并没有统计学差异，48 h［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-28）组相比，可以明显提高细胞的数量（P<0.05）。进一步的研究发现在［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组添加抑制剂Go6983后，细胞数量增多的效应消失（P<0.05）。Caspase-3检测凋亡结果显示，［Gly1,Arg19］hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）+Go6983组相比，在1 h和24 h具有抑制细胞凋亡（细胞凋亡受到抑制），但是差异无统计学意义。48 h检测细胞凋亡显示，［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-28）组相比，前者可以明显抑制细胞凋亡（P<0.05），给予PKC抑制剂Go6983后，其抑制凋亡现象消失。结论 PTH的nonPLC/PKC信号转导通路可能在长时间（48 h）作用于MC3T3-E1细胞时，可抑制细胞凋亡，提高细胞的数量。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-21 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 观察pannexin1通道在顺铂诱导睾丸癌I-10细胞凋亡中的作用及其机制。方法 MTT法检测细胞存活率；Annexin V/PI双染法和Hoechst 33258染色法分别检测细胞早期和晚期凋亡；化学发光法检测细胞外ATP浓度；ELISA法检测细胞内IP 3 含量。结果 MTT法显示pannexin1通道抑制剂CBX与顺铂合用组的细胞存活率高于单用顺铂组（P<0.01）；Annexin V/PI双染法显示CBX与顺铂合用组的细胞早期凋亡率低于单用顺铂组（P<0.001）；Hoechst 33258染色法显示CBX与顺铂合用组的细胞晚期凋亡率低于单用顺铂组（P<0.01）；化学发光法表明CBX与顺铂合用组的细胞外ATP浓度低于单用顺铂组（P<0.05）；ELISA法表明CBX与顺铂合用组的细胞内IP 3 浓度低于单用顺铂组（P<0.05）。结论 Pannexin1通道参与顺铂诱导睾丸癌I-10细胞的凋亡，其机制可能与介导ATP/IP 3 信号通路有关。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《分子影像学杂志》
摘要： 目的通过检测TLR4在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中表达变化，并与凋亡情况对比，研究TLR4在新生儿缺氧缺血性脑损伤发病机制中的作用，为临床的进一步研究提供客观的实验依据。方法选取80只7d龄新生健康大鼠，随机分为实验组和对照组各40只。TUNEL法检测脑组织细胞凋亡状况，免疫组化SP法检测TLR4表达变化。结果细胞凋亡缺氧缺血术后6h阳性率上升，至24 h达到高峰，72 h和7d表达下降。T1R4实验组于缺氧缺血6h即出现阳性表达，12h表达到峰值，24 h无明显变化，72 h和7d表达下降。实验组与对照组在各时间点比较差异均有统计学意义(p<0.05 ) } TLR4与细胞凋亡呈正相关(X0.452 )。结论新生大鼠缺氧缺血性脑损伤组织中TLR4高表达，可能促进细胞凋亡发生，在脑损害的形成过程中起到了重要的作用。
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