分类: 生物学 >> 生物化学 分类: 生物学 >> 分子生物学 提交时间: 2023-11-16
摘要: 目的:比较雄性大鼠交配行为后前两天尿液蛋白质组变化。方法:收集Sprague-Dawley大鼠交配当天的尿液样品和交配隔天的尿液样品,通过高效液相色谱串联质谱联用(LC-MS/MS)的非标记定量蛋白质组学技术进行分析,筛选尿液蛋白质组的差异蛋白(FC>1.5 或<0.67,P<0.050)进行蛋白质功能和生物学通路分析。结果:大鼠交配隔天与交配当天尿液蛋白质组比较可以鉴定到43个差异蛋白。通过Uniprot数据库和Pubmed数据库检索差异蛋白和相关文献报道,近三分之二的差异蛋白与精子发生相关。结论:大鼠交配隔天相较于大鼠交配当天,尿液蛋白质组就发生了变化,部分变化蛋白的已知功能与精子发生相关。
分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-21 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要: 目的 探讨小鼠DNAJB13与HK1是否具有相互作用。方法 应用双酶切连接方法构建pGEX-4T-1/Dnajb13原核表达载体,测序验证;重组质粒转化感受态细胞DH5α,用IPTG诱导融合蛋白GST-DNAJB13表达,采用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western blotting分析蛋白和鉴定;提取小鼠睾丸蛋白,采用GST pull down检测 DNAJB13与HK1是否具有相互作用。结果 成功构建pGEX-4T-1-Dnajb13重组质粒,测序结果与标准序列一致;转化重组质粒的大肠杆菌在37 ℃,IPTG浓度1 mmol/L诱导下高效表达融合蛋白;GST pull down检测结果阳性,显示DNAJB13与HK1存在相互作用。结论 在小鼠睾丸中,DNAJB13与HK1存在相互作用,可能参与精子形成和精子运动。