小鼠DNAJB13与HK1 的相互作用 后印本

摘要: 目的 探讨小鼠DNAJB13与HK1是否具有相互作用。方法 应用双酶切连接方法构建pGEX-4T-1/Dnajb13原核表达载体，测序验证；重组质粒转化感受态细胞DH5α，用IPTG诱导融合蛋白GST-DNAJB13表达，采用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western blotting分析蛋白和鉴定；提取小鼠睾丸蛋白，采用GST pull down检测 DNAJB13与HK1是否具有相互作用。结果 成功构建pGEX-4T-1-Dnajb13重组质粒，测序结果与标准序列一致；转化重组质粒的大肠杆菌在37 ℃，IPTG浓度1 mmol/L诱导下高效表达融合蛋白；GST pull down检测结果阳性，显示DNAJB13与HK1存在相互作用。结论 在小鼠睾丸中，DNAJB13与HK1存在相互作用，可能参与精子形成和精子运动。