传代次数对人胶质瘤U87细胞系生物学特性的影响 后印本

摘要: 目的 探索不同传代次数对人胶质瘤U87细胞系生物学特性的影响及其分子机制。方法 以两种不同传代次数的U87（I）、U87（II）为研究对象，使用MTT细胞增殖实验、Transwell小室迁移实验及Boyden小室侵袭实验分别检测U87细胞的增殖、迁移和侵袭能力；使用Western Blot技术检测U87（Ⅰ）及U87（Ⅱ）的CTHRC1, FOXM1, PLOD2, MMP9, TGF-β, E-cadherin,Slug, Snail, Vimentin, PI3K, p-PI3K, Akt, p-Akt的表达量差异。结果 U87（Ⅰ）较U87（Ⅱ）更容易形成网状结构，有更强的侵袭能力，但在增殖和迁移能力上二者无明显差异。在EMT相关蛋白表达水平上，U87（Ⅰ）中的Snail、Vimentin的表达量较U87（Ⅱ）的高，而E-Cadherin、Slug则较低；在PI3K/Akt通路蛋白表达水平上，U87（Ⅰ）的p-Akt，Akt的表达量均低于U87（II），而p-PI3K的表达量却高于U87（II），两者在PI3K的表达量上无明显差异；除此之外，U87（I）中PLOD2、CTHRC1及MMP9的表达量也明显高于U87（II），而TGF-β的表达量则低于后者。结论 随着传代次数的增加，U87细胞在侵袭能力以及多个促癌基因表达上发生了变化，这可能造成分子机制研究的前后结果不一致，降低结果的可信程度，因此研究人员在进行细胞系实验时，应尽可能在短时间内，使用同一批次细胞完成生物学特性、分子机制研究，以减少传代次数对肿瘤细胞系生物学特性以及基因表达的影响。