分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的:构建一个IRES序列介导的多基因共表达载体，实现两个目的基因和筛选标记基因共用一个启动子高效表达，提高多基因稳定共表达细胞株的筛选效率。方法:以实验室前期构建的载体pLV-MCS-Puro为骨架，设计并全基因合成双基因克隆表达元件，连接到骨架载体，构建多基因共表达载体pLV-2MCS-Puro，以DsRed2和EGFP荧光蛋白基因验证该载体用于多基因稳定共表达细胞株筛选的效率。结果:成功构建了pLV-2MCS-Puro载体以及DsRed2和EGFP共表达重组质粒pLV-DsRed2-EGFP-Puro。瞬时转染实验证明该载体能介导多基因共表达。抗性筛选获得了MDCK和Hela两种细胞的多基因稳定共表达细胞池。细胞池涂片荧光显微镜观察和计数表明抗性细胞池DsRed2和EGFP双阳率接近100％。基因组和转录水平PCR及蛋白免疫印迹实验表明DsRed2和EGFP稳定整合到抗性细胞基因组并且两种蛋白表达水平较为一致。结论:成功构建了多基因共表达载体pLV-2MCS-Puro，实现了两个目的基因和抗性基因串联共表达，并且具有高效的多基因稳定共表达细胞株筛选效率。该载体在研究蛋白相互作用以及工程细胞构建等方面具有一定的应用前景。
分类： 医学、药学 >> 预防医学与公共卫生学 提交时间： 2023-07-27 合作期刊: 《中国全科医学》
摘要： 背景老年人多重用药现象已日益普遍。而多重用药依从性与其治疗效果及安全性密切相关，故早期了解老年人多重用药依从性及其影响因素具有重要意义。但目前研究结论差异较大，尚无明确统一的标准。目的系统评价老年人多重用药依从性现状及其影响因素，为后期提高老年人多重用药依从性，减少不良反应，进一步制订个性化干预方案提供参考。方法计算机检索PubMed、Embase、WebofScience、CochraneLibrary、Scopus、Ovid、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据知识服务平台、维普网中有关老年人多重用药（年龄60岁，用药种类5种）依从性影响因素的队列研究、病例对照研究、横断面研究等观察性研究，检索时限为建库至2023年7月。由2名研究者按照纳入与排除标准独立进行文献筛选、质量评价以及资料提取。采用Stata17.0和RevMan5.3软件进行Meta分析。结果共纳入19篇文献，总样本量为130047例，其中服药依从性好的人数为50852例。Meta分析结果显示，老年人多重用药的服药依从率为41%〔95%CI（0.34，0.47）〕，多重用药依从性与年龄〔OR=2.62，95%CI（1.60，4.78），P<0.0001〕、性别〔OR=1.70，95%CI（1.30，2.23），P=0.0001〕、文化程度〔OR=1.73，95%CI（1.38，2.16），P<0.00001〕、居住方式〔OR=2.85，95%CI（2.18，3.72），P<0.00001〕、用药知识水平〔OR=1.14，95%CI（1.04，1.25），P=0.005〕、服药信念〔OR=2.06，95%CI（1.44，2.93），P<0.0001〕、抑郁〔OR=2.52，95%CI（1.96，3.24），P<0.00001〕、日常生活能力（ADL）〔OR=2.39，95%CI（1.68，3.38），P<0.00001〕、跌倒史〔OR=3.51，95%CI（2.03，6.06），P<0.00001〕、专业人员指导〔OR=3.75，95%CI（1.92，7.33），P=0.0001〕、用药种类数量〔OR=2.58，95%CI（1.96，3.41），P<0.0001〕、药物不良反应〔OR=3.08，95%CI（2.17，4.38），P<0.0001〕、用药方案复杂性〔OR=1.08，95%CI（1.03，1.14），P=0.004〕、药物管理〔OR=1.92，95%CI（1.34，2.75），P=0.0003〕、用药费用〔OR=2.60，95%CI（1.30，5.17），P=0.0007〕有关。敏感性分析结果显示，Meta分析结果相对稳定。Begg's检验（P=0.441）和Egger's检测（P=0.674）提示纳入文献的发表偏倚风险较低。结论老年人多重用药依从率为41%。且现有证据表明：一般因素（年龄、性别、文化程度、居住方式），心理、社会因素（抑郁、ADL、跌倒史、用药知识水平、服药信念、专业人员指导），药物因素（药物管理、用药费用、用药方案复杂性、用药种类数量、药物不良反应）是老年人多重用药依从性的影响因素，医务人员应根据老年人多重用药依从性的影响因素，制订个性化的干预措施，优化多重用药老年人疾病管理。
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