纤枝短月藓 BeLEA2 基因的克隆及表达分析

摘要: 为探究纤枝短月藓􀀁LEA2 基因的结构和表达特征，该研究以纤枝短月藓为材料，首次利用􀀁PCR 克隆技术得到纤枝短月藓􀀁BeLEA2 基因序列，对该基因进行分析。结果表明：该基因序列中含有􀀁2 个外显子和􀀁1 个内含子，其开放阅读框（ORF）为 456 bp，编码􀀁151 个氨基酸,预测其相对分子质量为􀀁16 515.96 Da。将纤枝短月藓与其他植物􀀁LEA2 基因氨基酸序列进行比对，构建系统进化树，结果显示纤枝短月藓与小立碗藓的亲缘关系最近。利用HiTail PCR 技术克隆获得􀀁1 072 bp 的􀀁BeLEA2 启动子序列，用􀀁PlantCARE 在线工具对该启动子的顺式作用元件进行预测，结果表明该启动子除了含有核心启动子元件􀀁TATA-box 和CAAT-box 外，还含有􀀁ABRE、MYB、MYC、MYB 结合位点（MBS）等其他顺式元件。实时荧光定量􀀁PCR 分析表明，BeLEA2 基因在纤枝短月藓不同发育时期和不同组织中都有表达，且对脱水胁迫有响应。以上结果为进一步探究􀀁LEA2 基因在苔藓植物中的功能及作用机制奠定了基础。