应用蛋白质组学技术筛选鉴定锌指蛋白139调控的胃癌转移相关蛋白质

摘要: 目的以胃癌SGC7901细胞原位移裸鼠模型为对象，通过荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)结合液质联用(LC-MS)质谱分析技术鉴定ZNF 139调控的胃癌转移相关蛋白质。方法合成针对ZNF 139的小干扰RNA (ZNF139-siRNA)，以ZNF 139-siRNA转染人胃癌细胞株SGC7901, G418筛选。以ZNF139-siRNA质粒转染的胃癌细胞、阴性质粒转染的胃癌细胞及普通胃癌细胞分别进行裸鼠胃癌原位移植。造模成功后取出原位移植瘤及腹腔转移淋巴结。荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)技术分别分离ZNF139-siRNA各组原位移植瘤及腹腔转移淋巴结蛋白质;选定差异点，胶内酶解后，液质联用(LC-MS )质谱分析技术鉴定蛋白质。蛋白印迹(Western blot)技术验证差异蛋白质的表达。结果转染ZNF 139-siRNA质粒后SGC7901细胞中ZNF 139的表达受到有效抑制。与阴性质粒组及空白组比较，阳性质粒组原位移植瘤生长更慢(P<0.05 )，且腹腔淋巴结转移率更低(P<0.05 )。蛋白质组学结果发现在阳性质粒组原发灶中Fascin, hnRNPA2/B 1表达下调，ANXA 1表达上调;阳性质粒组转移淋巴结中ANXAS表达下调(P<0.05 ) } Western blot验证结果与蛋白质组学结果相符。结论ZNF 139可能通过调节Fascin,hnRNPA2/B 1,ANXA1,ANXAS促进胃癌淋巴结转移。