远华蟾蜍精通过调节应激与凋亡通路诱导结直肠癌细胞的凋亡

摘要: 目的 研究远华蟾蜍精对结直肠癌（CRC）细胞活力及凋亡的作用，并分析其抑制细胞活力及诱导细胞凋亡的机制。方法四甲基偶氮唑盐法检测远华蟾蜍精对CRC细胞活力的影响，细胞核荧光染色及流式细胞术检测TBG对肿瘤细胞凋亡的作用；免疫荧光检测线粒体膜电位及细胞内ROS水平，Western blotting及应激与凋亡信号抗体芯片检测TBG作用于肿瘤细胞后凋亡相关蛋白表达变化。结果 TBG以浓度和时间依赖关系显著抑制HCT116、SW480的细胞活力；TBG诱导HCT116细胞发生核固缩，形成凋亡小体，增加Annexin V阳性细胞率；TGB上调细胞p53基因和Bax蛋白表达，促进Caspase9和PARP发生片段化；抗体芯片发现该药诱导肿瘤细胞中 Bad磷酸化和 PARP片段化，抑制了 IΚBα、TAK1蛋白磷酸化和 Survivin蛋白表达。结论TBG通过诱导细胞凋亡而显著抑制CRC细胞活力，其凋亡诱导作用可能与p53介导的Bax通路活化及IAP通路的阻断相关。