兔抗弓形虫Ⅰ型液泡型质子焦磷酸酶多克隆抗体的制备及鉴定 后印本

摘要: 目的 制备兔抗弓形虫I型液泡型质子焦磷酸酶（TgVP1）多克隆抗体并鉴定其应用。方法 选择弓形虫ME49株TgVP1氨基酸序列中的两条多肽，TgVP1-1与TgVP1-2，进行人工合成，并将其与KLH偶联作为抗原免疫新西兰大耳白兔，收集血清制备多克隆抗体，并通过ELISA、Western blot、免疫荧光等方法进行鉴定。结果 经间接ELISA测定，兔抗TgVP1-1及TgVP1-2的多克隆抗体效价均达1∶128000；Western blot结果显示两种多抗均能识别弓形虫天然蛋白中85000左右条带，与TgVP1预测相对分子质量大小相符，且特异性较好；通过免疫荧光技术检测到两株多抗识别的蛋白均定位于细胞质中，与酸性钙体的分布相同。结论 采用人工合成多肽为免疫原所获得的兔抗TgVP1多克隆抗体效价高，特异性好，弓形虫TgVP1和酸性钙体的深入研究奠定了基础，同时也为弓形虫病的诊断提供了新的有效工具。