赖氨酸对奶牛乳腺上皮细胞内乳脂肪合成相关基因和蛋白表达的影响

摘要: 本试验旨在研究赖氨酸（Lys）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳脂肪合成相关基因和蛋白表达的影响，探讨Lys影响乳脂肪合成的机理。将第3代BMECs随机分为6组，每组6个重复,每个重复1个培养孔。各组培养基中Lys的浓度分别为0.5（基础培养基，对照）、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，37 ℃、5% CO2培养48 h后测定BMECs甘油三酯（TAG）含量、乳脂肪合成相关基因和蛋白的表达量。结果表明：BMECs内TAG含量（P=0.013）以及脂肪酸结合蛋白3（FABP3，P=0.001）、脂蛋白脂酶（LPL，P=0.096）、脂肪酸合成酶（FASN，P=0.003）、乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6（AGPAT6，P=0.038）和甘油-3-磷酸酰基转移酶（GPAM，P=0.022）基因表达量对Lys呈显著或趋于显著的浓度依赖效应。FABP3基因表达量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组和LPL基因表达量以1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组显著高于0.5 mmol/L组（P<0.05）；FASN基因表达量以2.0 mmol/L组最高，显著高于16.0 mmol/L组（P<0.05）；硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）基因表达量以2.0、4.0 mmol/L组显著高于其他组（P<0.05）；磷脂酸磷酸酯酶1（LPIN1）、嗜乳脂蛋白亚家族1成员1（BTN1A1）和黄嘌呤脱氢酶（XDH）基因表达量均以1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L组显著高于0.5 mmol/L组（P<0.05）；过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因及蛋白表达量均以2.0、4.0 mmol/L组显著高于0.5和8.0、16.0 mmol/L组（P<0.05）；固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）基因表达量以1.0、2.0、4.0 mmol/L组显著高于其他组（P<0.05），蛋白表达量以1.0组显著高于其他组（P<0.05）。但高浓度Lys抑制AGPAT6和GPAM的基因表达，AGPAT6基因表达量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组显著低于0.5、1.0 mmol/L组（P<0.05），GPAM基因表达量以16.0 mmol/L组显著低于0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L组（P<0.05）。可见，Lys对BMECs的乳脂肪合成具有显著的促进效果，但高浓度的Lys抑制了乳脂肪合成相关基因的表达。本试验条件下，培养基中Lys适宜浓度为2.0~4.0 mmol/L。