分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2018-01-25 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要: 目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号途径是否介导晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导肾小管上皮细胞间充 质转分化(EMT)。方法 用次氯酸氧化牛血清白蛋白(BSA)制备的AOPP-BSA刺激体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细 胞), 用Western blotting检测细胞p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK的表达; 用p38 MAPK磷酸化抑制剂SB203580预处理细胞, 并予AOPP-BSA刺激, 用Western blotting和实时荧光定量PCR分别检测EMT标志性蛋白E-cadherin、vimentin和内质网应激标 志性蛋白GRP78和mRNA表达;用内质网应激(ERS)阻断剂salubrinal预处理细胞,并予AOPP-BSA刺激, 用Western blotting 检测细胞p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK的表达。结果 AOPP-BSA能使细胞p38 MAPK磷酸化; 用SB203580抑制p38 MAPK 磷酸化可显著抑制AOPP-BSA下调的E-cadherin和上调的vimentin和GRP78的表达;用salubrinal抑制ERS可有效地抑制 AOPP-BSA诱导的p38 MAPK磷酸化。结论 p38 MAPK信号途径可能参与了AOPPs诱导肾小管上皮细胞发生EMT的过程, 且 p38 MAPK受ERS调控。
分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要: 目的 探讨牛蒡子苷对 AOPPs诱导的肾小管上皮细胞 EMT的影响及其机制。方法 将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)分为3组:牛血清白蛋白(BSA)组、AOPPs组、AOPPs+牛蒡子苷组,用Western blotting和实时荧光定量PCR分别检测细胞 E-cadherin、vimentin和 GRP78的蛋白和 mRNA表达水平;以 DCFH-DA为荧光探针,流式细胞术检测细胞内活性氧水平。 结果 与BSA组相比,AOPPs组的上皮细胞标志性蛋白E-cadherin的蛋白和mRNA表达水平下调、间充质细胞标志性蛋白vimentin和内质网应激标志性蛋白GRP78的蛋白和mRNA表达水平上调、细胞内活性氧水平升高;与AOPPs组相比,AOPPs+牛蒡子苷组 E-cadherin蛋白和 mRNA表达水平上调、vimentin和 GRP78的蛋白和 mRNA表达水平下调、细胞内活性氧水平降低。 结论 牛蒡子苷可能通过抑制内质网应激进而减轻AOPPs诱导的肾小管上皮细胞EMT的发生,且氧化应激参与该过程。