分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要: 目的通过探索适宜的培养条件,建立小鼠肇丸器官培养模型。方法利用旋转通气培养法在体外培养肇丸,优化培养条件,并与Transwell小室培养法进行形态学比较。HE染色观察肇丸组织结构的变化,B rdU染色法观察肇丸在体外的细胞增殖,放射免疫法观察体外培养肇丸的肇酮分泌能力,免疫组化法观察肇丸中功能蛋白的表达。结果通过培养结局的对比,旋转通气培养法培养的肇丸组织形态更完整。肇丸大小以0.3-0.8 mm'为宜。各组精原细胞增殖指数呈上升趋势,Sertoli细胞增殖指数呈下降趋势:3d组精原细胞增殖指数的增加与1d组相比有统计学差异((P<0.05),5 d组Sertoli细胞增殖指数的减小与1d组相比有统计学差异(CP
分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要: 目的将多重实时荧光定量PCR技术与裸磁珠富集技术联用,建立辣椒样品中常见3类(曲霉属、青霉属、镰刀菌属)产毒性真菌的快速定量检测方法。方法根据真菌核糖体RNA(rDNA)基因序列选择真菌广谱引物及属特异性探针,联用裸磁珠富集技术,建立多重实时荧光定量PCR体系,并评价所建方法的灵敏度、特异性、重复性和一致性。结果裸磁珠一多重实时荧光定量PCR方法灵敏度高,与本研究优化后的普通实时荧光定量PCR相比提高了10倍,是原报道的100倍,直接检测辣椒样品中3类产毒性真菌的检出限均可达10' CFU/ml,即100 CFU/g,且特异性良好(与非目标菌无交叉反应)、重复性良好((CV0.05 ),实验过程仅需7 h(标准培养鉴定法耗时7-14 d)。结论构建的裸磁珠一多重实时荧光定量PCR方法能大大缩短产毒性真菌的检测时间,并成功应用于模拟辣椒样品中常见3类产毒性真菌的定量检测,值得进一步研究和推广。