分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的观察微小RNA-34a( miR-34a )对膀肤癌细胞J82周期的影响，并探索其中的机制。方法于J82中转染miR-34a前体或miR-34a抑制物并验证转染效率，结合此前研究报道和生物信息学预测miR-34a的靶点，后通过荧光素酶报告实验验证miR-34a革巴标基因CD44，通过Western blot和实时定量PCR方法检测CD44及其周期相关蛋白及信使RNA表达水平的变化，利用流式细胞仪检测膀肤癌细胞J82周期的变化。结果miR-34a在膀肤癌细胞J82和组织中表达下调，转染miR-34a前体和抑制物后，获得满意的转染效果;双荧光素酶报告实验证实miR-34a对CD44的3'UTR活性显著调节，并伴随相关周期相关因子表达水平变化，同时观测到其对膀肤癌细胞J82周期的影响。miR-34a mimics明显降低膀肤癌细胞J82中CD44的表达，miR-34a inhibitor明显上调膀肤癌细胞J82中CD44的表达;CD44可以部分回复mir-34a对膀肤癌细胞J82周期的影响。结论微小RNA-34a通过直接靶向CD44调节膀肤癌细胞J82周期的变化
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2018-01-25 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 探讨长链非编码RNAPTENP1在膀胱癌发生发展中的分子机制。方法 通过逆转录实时定量PCR（qRT-PCR）分别 检测PTENP1，PTEN，miR-17在膀胱癌中的基础表达并关联分析。利用Western blot检测膀胱癌细胞系T24与5637中超表达 PTENP1后PTEN的表达变化。通过荧光素酶报告试验验证miR-17对PTENP1及PTEN的靶向作用。最后通过在膀胱癌细胞 系T24和5637中共表达miR-17和PTENP1，建立稳定共表达细胞系进行增殖和迁移实验，探索长链非编码RNAPTENP1在膀 胱癌发生发展中的分子机制。结果 miR-17在膀胱癌中普遍呈现高表达趋势，PTENP1在膀胱癌中呈现普遍低表达趋势（P< 0.05）。与此同时miR-17和PTENP1的基础表达为负相关，PTENP1与PTEN的基础表达为正相关。WB实验发现于膀胱癌细 胞系T24和5637中过表达PTENP1后可以在翻译水平增加PTEN的表达，荧光素酶报道实验验证了miR-17可同时靶向 PTENP1及PTEN，在膀胱癌中miR-17具有促癌功能，同时在膀胱癌细胞中我们发现miR-17可以部分回复PTENP1的抑癌功 能。结论 长链非编码RNAPTENP1在膀胱癌中发挥抑癌功能的分子机制可能是PTENP1结合miR-17作为竞争性内源RNA 竞争，从而降低miR-17对抑癌基因PTEN的表达抑制。
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