提取液及固–液分离方法对固态非淀粉多糖酶类活性的影响

分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》

廖 睿 赵 峰 齐智利 张宏福

摘要： 本试验旨在探讨固态酶制剂评估中酶的适宜提取液及固–液分离方法。采用4×3双因素完全随机设计，其中提取液分别为去离子水、乙酸–乙酸钠缓冲液（0.1 mol/L，pH 5.50）、磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L，pH 6.00）和0.9%NaCl溶液；溶液提取后的固–液分离方法分别为不分离、3 000 r/min离心3 min和中速滤纸过滤。每个处理5个重复，每个重复设2个平行，测定各个处理下酶的活性，并考察提取液的类型对酶制剂产品（α–半乳糖苷酶除外）溶解离心后溶液中溶质及蛋白质含量的影响。结果表明，磷酸盐缓冲液溶解木聚糖酶后活性最高（P0.05），且均显著地高于去离子水（P0.05）。酶制剂溶解后的固–液分离方法对木聚糖酶的测定活性无显著性影响（P>0.05）；提取液离心或过滤后β–葡聚糖酶活性最高（P<0.05）；提取液离心后β–甘露聚糖酶活性最高（P<0.05）；而提取液不分离时α–半乳糖苷酶的活性最高（P<0.05）。提取液的种类和酶制剂溶解后的固–液分离方法对4种非淀粉多糖酶的测定活性有极显著的交互作用（P<0.01）。乙酸–乙酸钠缓冲液对木聚糖酶制剂的溶解度最大（P<0.05），去离子水和0.9%NaCl溶液均对β–葡聚糖酶及β–甘露聚糖酶制剂的溶解度最大（P<0.05）。然而，乙酸–乙酸钠缓冲液溶解木聚糖酶、β–葡聚糖酶、β–甘露聚糖酶后提取液中蛋白质的含量均最低（P<0.05）。上述结果表明，乙酸–乙酸钠缓冲液溶解4种固态酶制剂可以最有效地将酶蛋白提取出来，α–半乳糖苷酶提取后不宜固液分离，而其他3种酶的提取液适宜进行离心分离。

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