黄芩素通过WNT/β-catenin信号通路促进大鼠腱骨愈合

分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《分子影像学杂志》

江华基（2）；江小成（1）；贺飞林（1）；廖小卿（1）；张文涛（1）；张新涛（1）

摘要： 目的探讨黄芬素对大鼠健骨愈合的作用及相关分子机制。方法取40只8周龄的雄性SD大鼠，随机分为对照组((n=20)和实验组(m=20)。两组动物均行大鼠健骨愈合模型造模。实验组大鼠灌胃黄芬素10 mg/(雌" d)，对照组灌胃等量的生理盐水。术后3周、6周各处死10只大鼠并取材，通过生物力学、组织学观察各组健骨愈合的程度。此外，体外培养原代大鼠肌健干细胞，加入不同浓度(0,0.1,1,10 wmol/L)的黄芬素处理，14d后分别进行ALP、茜素红染色。Q-PCR,Western Blot检测Runx2,OSX,OCN、一型胶原以及p-catenin的变化。随后，在肌健干细胞中加入10 wmol/L的黄芬素，并且加入WNT/p-catenin通路抑制剂DKK-1共培养，14d后收集蛋白行Western Blot检测，观察p-catenin,Runx2以及OCN蛋白表达的变化。结果生物力学结果显示术后3周和术后6周时实验组的健骨愈合程度明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05 )。组织学结果显示实验组在术后3周和6周时健骨界面细胞成熟程度更高，sharpey纤维生长密集度与间质钙化程度更高。ALP、茜素红染色、Q-PCR和Western Blot结果显示不同浓度黄芬素均能提高肌健干细胞的ALP活性，增加矿化结节形成、提高Runx2,OSX,OCN、一型胶原和p-catenin的表达。而p-catenin抑制剂DKK-1后能显著降低黄芬素的这种促成骨作用。结论黄芬素可以有效促进健骨界面细胞成熟与健骨界面的胶原分泌，加速健骨愈合并提高健骨愈合质量，这种促进作用呈现WNT/日-catenin信号依赖性

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