二陈汤干预ATG7/FTH1通路改善痰湿型多囊卵巢综合征卵泡功能的研究 后印本

摘要: 背景  多囊卵巢综合征（PCOS）是一类尚无明确病因的妇科内分泌代谢性疾病，患病率日渐年轻化、普遍化，因此研究PCOS分子生物学层面的发病机制，为临床治疗提供相关依据，守护女性健康。目的  以中医学“痰湿”体质导致不孕的理论为依据，探讨二陈汤对PCOS卵巢颗粒细胞内线粒体自噬依赖性的铁死亡的改善作用。方法  辽宁中医药大学实验动物中心提供SPF级实验室及32只SD雌性大鼠，适应性喂养1周后，随机将32只大鼠分为对照组（n=10）和模型组（n=22）。对照组给予普通维持饲料全程喂养，共12周；模型组全程给予高脂饲料喂养，造模期间每日来曲唑溶液灌胃。造模完毕选取动情周期紊乱的模型组大鼠作为治疗组（n=12），每日给予二陈汤煎剂灌胃连续4周进行治疗。取材后对大鼠卵巢进行HE染色法观察病理变化，透射电镜拍摄3组大鼠卵巢颗粒细胞线粒体形态学变化，WesternBlotting法检测大鼠卵巢颗粒细胞自噬相关基因7（ATG7）、P62、抗自噬效应蛋白1（Beclin1）、微管相关蛋白Ⅰ轻链3（LC3Ⅰ）、微管相关蛋白Ⅱ轻链3（LC3Ⅱ）、铁蛋白重链1（FTH1）、线粒体呼吸链组装蛋白2（ISCU2）蛋白水平变化。O2K线粒体功能测定系统检测卵巢颗粒细胞线粒体耗氧率变化。结果  模型组大鼠卵巢囊性卵泡增多，黄体减少并且卵巢颗粒细胞线粒体出现自噬与铁死亡现象，治疗组治疗后形态部分恢复。与对照组相比，模型组ATG7、P62、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达升高（P<0.05），LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高（P<0.05），LC3Ⅰ、FTH1、ISCU2蛋白表达减少（P<0.05）；与模型组相比，治疗组ATG7、P62、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达降低（P<0.05），LC3Ⅱ/LC3Ⅰ降低（P<0.05），FTH1蛋白表达升高（P<0.05）。三组ETS、CⅠ、CⅡ耗氧率比较，差异有统计学意义（P<0.05）；其中模型组ETS、CⅠ、CⅡ耗氧率低于对照组，治疗组ETS、CⅠ、CⅡ耗氧率高于模型组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论  二陈汤通过ATG7/FTH1通路逆转卵巢颗粒细胞自噬依赖性铁死亡，改善痰湿型PCOS大鼠的卵泡功能。