摘要: 目的为研究人肝癌细胞系HepG2线粒体DNA ( mtDNA)缺失后的放射生物学特性，建立并鉴定mtDNA缺失HepG2(p0HepG2)细胞系。测定辐射干预下mtDNA缺失(CRh00)肝癌细胞的凋亡情况、侵袭能力以及辐射敏感性的变化。方法在含有嗅化乙锭(EB)、丙酮酸、尿嚓陡的特殊培养基中培养HepG2细胞，经30次传代后，有限稀释法筛选完全去除mtDNA的克隆。去除丙酮酸及尿嚓陡后，观察细胞的存活情况。PCR法鉴定mtDNA的缺失。用6MvX射线梯度剂量照射HepG2细胞和p0HepG2细胞，平板克隆法绘制生长曲线，线性二次方程拟合生存曲线，计算α/β。2Gy剂量辐射细胞，24 h后用Hochest33342细胞核染色，比较HepG2细胞与p0HepG2凋亡率的差异。用Transwell法测定两种不同细胞的侵袭能力。结果在含EB特殊培养环境下，HepG2细胞可持续生长传代至30代，去除丙酮酸和尿嚓陡后，细胞短时间内大量死亡。经PCR法证实mtDNA完全缺失。p0HepG2细胞a/p显著低于正常HepG2细胞，辐射抵抗能力增强。辐射干预后p0HepG2的凋亡比例显著减少。p0HepG2穿膜细胞数显著增多。结论在EB长期诱导下，HepG2肝癌细胞可被成功诱导为mtDNA缺失细胞。p0HepG2细胞的辐射抵抗性显著增强，抗凋亡能力及侵袭能力均提高。
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