分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2018-06-15 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 通过白细胞介素-22（IL-22）干预类风湿关节炎（RA）成纤维滑膜细胞（FLS）以期明确 IL-22 促进其增殖的机制。 方法 无菌条件下获取的RA 滑膜组织，应用组织块分离法培养RA-FLS，含10% FBS 的DMEM 培养基进行细胞传代培养，并对 第4~5 代FLS 应用vimentin/CD68 进行免疫组化法鉴定；不同浓度的IL-22 干预FLS 培养24、48、72 h 后，MTT 法检测细胞增殖 程度；联合IL-22 和/或AG490 干预FLS，于冰面上用含蛋白酶抑制剂的细胞裂解液获取细胞总蛋白，再经超声、离心提取、蛋白 定量后，Western blot 法检测STAT3、ERK1/2、P38 蛋白及其磷酸化蛋白的表达，统计分析采用SPSS20.0 软件进行，P0.05）。联合50 ng/mL IL-22 和100 μmol/L AG490 干预FLS 不同时间后，细胞的增殖程度较单用 IL-22 干预均显著降低（P<0.01）。结论 IL-22 以浓度依赖方式促进RA 成纤维化膜细胞STAT3 蛋白磷酸化所介导的细胞增殖，而非ERK1/2 和P38 蛋 白所介导的信号通路。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2018-01-25 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 通过白细胞介素-22（IL-22）干预类风湿关节炎（RA）成纤维滑膜细胞（FLS）以期明确IL-22促进其增殖的机制。 方法 无菌条件下获取的RA滑膜组织，应用组织块分离法培养RA-FLS， 含10% FBS的DMEM培养基进行细胞传代培养，并对 第4~5代FLS应用vimentin/CD68进行免疫组化法鉴定；不同浓度的IL-22干预FLS培养24、 48、 72 h后，MTT法检测细胞增殖 程度；联合IL-22和/或AG490干预FLS，于冰面上用含蛋白酶抑制剂的细胞裂解液获取细胞总蛋白，再经超声、离心提取、蛋白 定量后，Western blot法检测STAT3、ERK1/2、 P38蛋白及其磷酸化蛋白的表达，统计分析采用SPSS20.0软件进行， P0.05）。联合50 ng/mL IL-22和100 μmol/LAG490干预FLS不同时间后，细胞的增殖程度较单用IL-22干预均显著降低 （P<0.01）。结论 IL-22以浓度依赖方式促进RA成纤维化膜细胞STAT3蛋白磷酸化所介导的细胞增殖，而非ERK1/2和P38蛋 白所介导的信号通路。
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