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  • 中间锦鸡儿CiMYB15基因正调控拟南芥黄酮代谢

    Subjects: Biology >> Bioengineering submitted time 2018-08-06 Cooperative journals: 《中国生物工程杂志》

    Abstract:R2R3-MYB类转录因子参与调控植物初生和次生代谢。本研究从中间锦鸡儿(Caragana intermedia)干旱转录组数据库中搜索并克隆了一个R2R3-MYB基因,命名为CiMYB15(GenBank登录号MH678649);将CiMYB15基因编码区转入野生型拟南芥中,利用分光光度法测定了野生型和转基因拟南芥中总黄酮含量,并用qRT-PCR检测了转基因植物中AtCHS基因的表达情况。同时采用染色体步移法克隆了CiMYB15基因的启动子序列。结果表明:(1)CiMYB15基因gDNA长度为1960 bp,包含三个外显子(134、131和521 bp)和两个内含子(281和893 bp);开放阅读框长度为786 bp,编码262个氨基酸。(2)克隆得到1580 bp的启动子序列,序列中主要包含损伤诱导元件G-box和P-box、盐诱导作用元件GT1-motif、参与干旱诱导的反应元件MBS,以及真菌侵害应答元件BOX-W1、植物-病原菌互作元件EIER;此外,还包含调节黄酮合成基因的MYB转录因子的结合位点。(3)CiMYB15基因的表达受到紫外胁迫的诱导。(4)CiMYB15基因过表达株系的总黄酮含量高于野生型。(5)过表达植物中AtCHS基因的表达量亦高于野生型。以上结果说明,CiMYB15基因正调控拟南芥黄酮代谢。

  • 中间锦鸡儿CiNAC1基因促进转基因拟南芥叶片的衰老

    Subjects: Biology >> Bioengineering submitted time 2018-02-11 Cooperative journals: 《中国生物工程杂志》

    Abstract:NAC转录因子家族是植物特有的、最大的转录因子家族之一,参与植物生物胁迫和非生物胁迫应答、激素信号转导、植物次生生长、细胞分裂和植物衰老等多种过程,在植物生长发育过程中起着重要的作用。本实验以中间锦鸡儿CiNAC1基因的过表达拟南芥纯合体株系为材料,以野生型为对照,对CiNAC1基因功能进行分析。结果发现,乙烯处理后,CiNAC1基因过表达株系与野生型拟南芥相比,叶片衰老提前、叶绿素含量降低、离子渗透率升高。实时荧光定量PCR检测发现,乙烯处理后CiNAC1基因过表达株系中与叶绿素降解相关的基因SGR1、SGR2、PPH,以及与衰老相关的基因SAG13、SAG29、ORE1、SINA1 、VNI2和乙烯信号途径中的重要转录因子EIN3的表达量均明显高于野生型拟南芥。表明CiNAC1基因在乙烯诱导的叶片衰老过程中发挥重要作用。

  • 中间锦鸡儿CibHLH027基因的克隆和功能研究

    Subjects: Biology >> Bioengineering submitted time 2017-11-26 Cooperative journals: 《中国生物工程杂志》

    Abstract:叶片衰老是植物生长发育的最后阶段,黑暗、干旱和极端温度等会加速叶片衰老过程,严重影响植物的生长发育和作物产量。bHLH(basic helix-loop-helix)属于转录调控因子中的一个大家族,因具有保守性较高的bHLH结构域而得名,广泛存在于真核生物界。本研究在中间锦鸡儿(Caragana intermedia)转录组数据库中,得到一条候选 bHLH基因全长序列,将其命名为CibHLH027。正常和黑暗诱导的情况下,CibHLH027-OE株系较WT相比叶片衰老明显,并且黑暗处理后叶绿素含量下降、离子渗透率增大、细胞膜受损严重,说明CibHLH027参与了叶片衰老调控过程。

  • 中间锦鸡儿CibHLH027基因的克隆和功能研究

    Subjects: Biology >> Bioengineering submitted time 2017-11-26 Cooperative journals: 《中国生物工程杂志》

    Abstract:叶片衰老是植物生长发育的最后阶段,黑暗、干旱和极端温度等会加速叶片衰老过程,严重影响植物的生长发育和作物产量。bHLH(basic helix-loop-helix)属于转录调控因子中的一个大家族,因具有保守性较高的bHLH结构域而得名,广泛存在于真核生物界。本研究在中间锦鸡儿(Caragana intermedia)转录组数据库中,得到一条候选 bHLH基因全长序列,将其命名为CibHLH027。正常和黑暗诱导的情况下,CibHLH027-OE株系较WT相比叶片衰老明显,并且黑暗处理后叶绿素含量下降、离子渗透率增大、细胞膜受损严重,说明CibHLH027参与了叶片衰老调控过程。