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  • 胭脂萝卜花青素提取及对NCI-N87细胞增殖侵袭的影响

    分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

    摘要: 为研究胭脂萝卜花青素的提取工艺,考察了液料比、浸提温度、浸提时间、超声功率、超声时间对花青素提取率的影响。采用MTT实验、细胞侵袭实验研究了花青素对人胃癌细胞NCI-N87增殖、侵袭的作用,进一步用免疫印迹分析其对HER2信号通过的影响。结果表明,结合响应面分析得出胭脂萝卜花青素最佳提取工艺为:以1%盐酸乙醇为提取剂,液料比10:1,40℃浸提2h,400w超声波破碎15min,在此条件下,花青素的最高提取量为3.92mg/g。30μg/mL的胭脂萝卜花青素能显著抑制NCI-N87细胞的增殖和侵袭能力,同时抑制HER2蛋白及Akt的磷酸化水平。

  • DHA对宫颈癌细胞株凋亡、侵袭和转移的影响

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的 探讨多不饱和脂肪酸DHA对宫颈癌细胞(HeLa、Siha)凋亡、迁移侵袭的影响。方法 HeLa、Siha细胞,分为空白对照组、不同浓度DHA组,观察不同药物浓度作用于宫颈癌细胞后的形态学改变,Hoechst 33258染色检测48 h后细胞核凋亡情况;MTT法检测DHA作用于宫颈癌细胞24、48、72 h后的细胞凋亡情况;流式细胞仪检测不同浓度DHA作用于宫颈癌细胞48 h后的凋亡率;细胞划痕实验和 Transwell迁移实验检测不同浓度DHA对宫颈癌细胞体外迁移能力的影响;Western Blotting检测DHA刺激细胞 48 h后凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、cleaved-caspase3)及肿瘤转移侵袭相关蛋白 MMP-9、VEGF表达情况。结果倒置显微镜下及经Hoechst33258染色后,随着DHA浓度增加,宫颈癌细胞形态改变越明显,凋亡小体增多;MTT结果显示DHA呈时间-浓度依赖性抑制宫颈癌细胞增殖,促进其凋亡;细胞划痕实验和transwell迁移实验提示DHA作用于细胞后,浓度越高,对细胞的体外迁移能力的抑制作用越强;Western Blotting显示 DHA作用于细胞 48 h后,cleaved-caspase3、Bax蛋白表达增加(P<0.05),而 Bcl-2、MMP-9、VEGF 蛋 白 表 达 下 降(P<0.05),Bcl-2/Bax 比 值 下 降(P<0.05)。 结 论 DHA 可 通 过 调 控cleaved-caspase3、Bax及Bcl-2表达,促进宫颈癌细胞凋亡的作用并能通过降低MMP-9、VEGF的表达抑制宫颈癌细胞的迁移和侵袭。