Loading [MathJax]/extensions/MathMenu.js
  • 沉默MSH3表达增强舌癌细胞对顺铂的敏感性

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2018-01-25 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的 设计靶向DNA错配修复基因MSH3的 siRNA干扰片段,观察MSH3有效沉默对舌癌细胞顺铂耐药性的影响。方 法 针对MSH3基因CDS区序列,设计3条siRNA片段,体外化学合成小干扰RNA(siRNA)片段,通过脂质体介导转染人舌癌细 胞CAL27。Real-time PCR及Western检测干扰后MSH3的表达。MTS,凋亡双染法及细胞免疫荧光检测顺铂处理后细胞存 活、凋亡及DNA双链断裂的情况。结果 3条siRNA片段转染细胞后,与对照组相比, 3号siRNA片段转染后能显著降低 MSH3 mRNA及蛋白质表达水平,该片段被选为后续实验。MSH3表达下调后,顺铂的半数抑制浓度(IC50值)分别由21.32降 至13.95 μmol/L(P<0.05),凋亡指数分别由4.23±1.27升至11.32±1.82(P<0.05),舌癌细胞中γ-H2AX焦簇(Foci)的数量显著增 加。结论 MSH3表达下调可以明显增加舌癌细胞对顺铂的敏感性,减少DNA双链断裂修复是其主要机制之一。