Acyl-ACPs的规模化合成

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-03-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

丁威 冯延宾 曹旭鹏 薛松

摘要： 脂酰-酰基载体蛋白（fatty acyl-acyl carrier protein, acyl-ACP）是多种生物合成途径中的酰基供体。因供给限制，体外研究常用类似物acyl-CoA替代，而CoA部分和ACP有较大差异，限制了相关酶对底物识别的认识。因此稳定获得大量acyl-ACP是体外研究相关酶的催化机制及其代谢途径的关键。研究以holo-ACP和C4-C18链长脂肪酸为底物，在哈氏弧菌acyl-ACP合成酶（Vibrio harveyi acyl-ACP synthetase, VhAasS）催化下合成不同碳链长度的acyl-ACP；通过高效液相色谱(HPLC)方法，确定不同碳链长度acyl-ACP的合成产率。结果表明：碳链为C4-C14的acyl-ACP产率均高于90.0%，16:0-ACP产率为85.9%，18:1-ACP产率仅为25.7%。通过加入Li+优化反应体系，16:0-ACP、18:1-ACP的产率达90.0%。进一步优化扩大反应体系可稳定获得20 mg以上acyl-ACP；最后，把合成的acyl-ACP应用到甘油-3-磷酸酰基转移酶催化的反应体系中。不同链长acyl-ACP的规模化合成研究，为体外研究相关酶的催化机制提供重要基础。

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