分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-04-19 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：研究pH调控对发酵法生产环β-1,2-葡聚糖的影响，并对pH调控条件下的环葡聚糖的结构进行解析。方法：以根瘤菌ATCC 1333为研究对象，进行pH调控与不调控的发酵过程分析，并结合乙醇分级沉淀对pH调控后的发酵液中多糖进行分离提纯，经Superose 12层析纯化，利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-MS)、单糖组成分析、电喷雾串联质谱(ESI-MS)，傅里叶红外光谱(FTIR)，核磁共振(NMR)手段对葡聚糖进行结构鉴定。结果：提出两阶段pH调控发酵策略，生长期pH控制为7.0，产糖期pH控制为5.5，与自然发酵模式相比，环葡聚糖产量增加了52%，细胞浓度增加了102%，并且发酵颜色不再发生褐化现象，更有利于后续环葡聚糖的分离纯化。并确定pH调控对根瘤菌ATCC 1333发酵生产的葡聚糖的结构并无影响，合成的环葡聚糖是以葡萄糖为单体，通过β-1,2糖苷键连接的环葡聚糖，聚合度从17-22，以19为主的环状葡聚糖，无支链结构。结论：pH调控对于发酵生产环β-1,2-葡聚糖的结构无影响，为环β-1,2-葡聚糖的发酵工艺研究提供理论基础，也为研究β-1,2-葡聚糖提供可靠的糖源。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-03-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的 制备特异性抗人表皮生长因子受体(EGFR)的单链抗体（scFv），鉴定其生物学活性，为进一步研究基于单链抗体的免疫治疗奠定基础。方法 从分泌抗人EGFR单克隆抗体的杂交瘤细胞系提取总RNA，利用5’RACE技术扩增轻链和重链可变区（VL、VH）基因，构建具有VL、VH基因的单链抗体基因，并将构建的单链抗体基因克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中进行表达和鉴定。ELISA鉴定单链抗体对抗原的特异性；Fortebio检测抗原抗体间的亲和力，流式细胞术检测单链抗体结合肺癌细胞系天然EGFR的功能活性。结果 获得唯一的轻重链可变区序列VL、VH，成功构建EGFR-scFv，特异性与天然EGFR蛋白结合，亲和力达3.22×10-9mol/L。结论 成功构建了抗人EGFR单链抗体，为肺癌免疫导向治疗研究奠定了基础。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-21 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 探讨早期不同的血压控制目标对高血压性脑出血（HCH）患者血肿扩大及预后的影响。方法 2013年1月~2016年7月郑州人民医院神经内科收治的HCH患者102例，随机分成A组（51例）和B组（51例），在入院48 h 内两组采用不同的收缩压（SBP）控制目标：A组采取早期积极降压治疗，SBP目标（130~140）mmHg；B组采取标准降压治疗，SBP目标（170~180）mmHg。观察两组患者血肿变化及预后情况。结果 治疗48 h后，A组患者的SBP、血肿体积及美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）均明显低于B组，Glasgou昏迷量表（GCS）明显高于B组（P<0.01或P<0.05）。治疗30 d后，A组疗效等级指标优于B组（Z=2.331，P=0.020），差异有统计学意义；A组患者的病死率低于B组（χ 2 =2.772，P=0.096），但差异无统计学意义。结论对高血压性脑出血患者实施早期积极降压治疗安全可行，能减少血肿扩大，减轻神经功能恶化，改善预后。
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