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  • 3D水凝胶压应力模型建立及压应力对成骨细胞的影响

    分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

    摘要: 目的:本研究在之前压应力细胞模型的基础上,尝试建立3D水凝胶细胞模型,同时采用不同强度、频率、时间对MC3T3-E1细胞进行机械加压干预,观察压应力对成骨细胞分化的影响,探讨促进成骨细胞分化的适宜压应力方案。方法:成骨细胞MC3T3-E1复苏后常规培养,3D水凝胶建模成功,细胞种板后,第二天对细胞进行压应力干预,设计不同强度、频率的压应力梯度方案对3D水凝胶进行干预,对照组细胞不进行干预正常培养。在此基础上,通过统计学计算出有效的强度和频率压应力方案,后以一个方案按照不同干预时间施加压应力。加压干预结束后即刻收集细胞,对样本中的ATF4、ALP、Runx2、Osteocalcin、RANKL 和RANK mRNA进行定量检测。结果:针对不同强度和频率梯度压应力的数据,先采用双因素方差分析,发现不同频率压应力对RANKL和RANK作用显著(P<0.05);强度和频率对ALP(P<0.05)、Runx2(P<0.01)交互作用显著。针对不同时间梯度压应力的数据,采用单因素方差分析,发现4h加压Runx2的表达量比12h加压的高(P<0.05);4h加压RANKL的表达量比12h加压的低(P<0.05)。结论:在3D水凝胶模型中,以1%强度、0.5Hz频率、4h的压应力干预方案能够促进成骨细胞系的生长。