分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-25 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本研究旨在探讨苏氨酸对大鼠小肠上皮细胞活性和增殖的影响，并研究苏氨酸是否对大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白表达具有调控作用。试验采用不同浓度的苏氨酸（0、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 mmol/L）处理大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞24 h，用噻唑兰（MTT）法测定IEC-6细胞活性，伊红-美蓝（HE）染色观察IEC-6细胞增殖情况，Western-blot法检测IEC-6细胞紧密连接蛋白表达情况。结果表明：各浓度的苏氨酸均能不同程度地提高IEC-6细胞的活性，0.5 mmol/L苏氨酸处理24 h时IEC-6细胞的活性最高，且与未经苏氨酸处理的对照组差异显著（P0.05），但显著促进了occludin的表达（P<0.05）；苏氨酸浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 mmol/L时均显著促进上述2种紧密连接蛋白的表达（P<0.05），使claudin-3的相对表达量分别增加了1.84、7.08、8.71、3.83倍，occludin的相对表达量分别增加了2.65、2.71、2.82、3.88倍。综上，适宜浓度的苏氨酸对大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞的活性和增殖具有促进作用，且在浓度为0.5 mmol/L时作用最显著，同时促进了紧密连接蛋白claudin-3和occludin的表达。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-11-08 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本研究旨在探讨香菇多糖对大肠杆菌攻毒大鼠空肠形态结构、上皮细胞数量和紧密连接蛋白表达的影响。将24只SD大鼠随机分成4个组（A、B、C、D组），每组6个重复，每个重复1只。A、B组饮用蒸馏水，C、D组饮用蒸馏水中添加20 μg/mL的香菇多糖；试验第15天B、D组灌服1×1010 CFU/mL大肠杆菌K88，A、C组灌服等量生理盐水。试验第18天心脏采血处死，取空肠固定和冻存，制作石蜡切片，苏木精-伊红（HE）染色和高碘酸雪夫氏（PAS）染色，测定绒毛高度、隐窝深度、绒毛宽度、上皮内淋巴细胞（IEL）数量和上皮杯状细胞（GC）数量，计算绒毛高度与隐窝深度的比值（V/C）；并采用蛋白质印迹法（Western-blot）测定空肠紧密连接蛋白Occludin的表达水平。结果表明：各组绒毛高度和绒毛宽度无显著差异（P>0.05）。C组隐窝深度极显著低于A、B组（P0.05）。D组Occludin表达水平明显高于A、B和C组，B组Occludin表达水平高于A组。综上，大鼠饮用水中添加香菇多糖可改善大鼠空肠形态结构，并提高其抵抗大肠杆菌感染能力，促进Occludin的表达。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 为了研究应激和氨基酸对上皮抗菌肽表达的作用和分子机制，试验选用猪小肠上皮细胞系IPEC-J2作为研究对象，饥饿和大肠杆菌感染分别作为营养应激和细菌应激，丙氨酸和异亮氨酸作为氨基酸处理，收集细胞mRNA，利用荧光定量PCR测定β防御素和相关信号通路蛋白表达水平。结果表明：与对照组（DMEM/F12培养基）相比，饥饿显著降低了小肠上皮细胞猪防御素2（pBD-2）、猪防御素3（pBD-3）和猪防御素EP2c（pEP2c）及沉默信息调节因子2同源蛋白1(Sirt1)、叉头转录因子1（FoxO1）和叉头转录因子4(FoxO4)的表达（P0.05）。与对照组（饥饿培养基）相比，丙氨酸处理未显著影响pBD-2和pBD-3的表达（P>0.05），但显著提高了pEP2c表达水平（P<0.05）；异亮氨酸处理使pBD-2、pBD-3和pEP2c表达水平显著升高（P<0.05）。与对照组相比，丙氨酸和异亮氨酸处理不同程度影响信号通路蛋白转录，丙氨酸处理显著提高了Sirt1和FoxO4的表达水平（P<0.05），异亮氨酸处理显著促进了Sirt1、FoxO1和FoxO4的表达（P<0.05）。由此得出，营养应激降低猪小肠上皮细胞中β防御素的表达，而氨基酸的补充可促进其表达，该调控作用可能与Sirt1和叉头转录因子（FoxO）信号通路蛋白有关。
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