分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究不同浓度的组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2（JAK2）-信号转导与转录激活子5（STAT5）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关磷酸化蛋白表达的影响。将原代奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养，分为对照组和7个试验组，采用无必需氨基酸的培养基，对照组不添加组氨酸，试验组是在对照组基础上分别添加0.15、0.60、1.20、2.40、4.80、9.60、19.20 mmol/L的组氨酸。采用噻唑蓝比色法检测原代奶牛乳腺上皮细胞12 h增殖；运用蛋白质免疫印迹检测β-酪蛋白和7个信号通路相关磷酸化蛋白表达。结果表明：1）当组氨酸浓度为0.15~9.60 mmol/L时，与对照组相比，奶牛乳腺上皮细胞数量均增加。2）β-酪蛋白表达量随组氨酸浓度的增加出现先升高后降低的趋势，但试验组均极显著高于对照组（P<0.01）。3）与对照组相比，组氨酸的添加可极显著促进各信号通路相关磷酸化蛋白的表达（P<0.01）；试验组中，随着组氨酸浓度的升高，磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白[P-mTOR（Ser2481）]和磷酸化真核细胞翻译延伸因子2[P-eEF2(Thr56）]蛋白的表达量下降，而磷酸化核糖体S6蛋白激酶1[P-S6K1(Thr389)]的蛋白表达增加；当组氨酸浓度为2.40 mmol/L时，磷酸化酪氨酸激酶2[P-JAK2(Tyr1007/1008）]、磷酸化真核细胞始动因子4E结合蛋白1[P-4EBP1（Thr37）]和磷酸化真核细胞起始因子2α[P-eIF2α(Ser51）]蛋白的表达量最高，磷酸化信号转导与转录激活子5[P-STAT5(Tyr694)]、磷酸化mTOR调控蛋白[P-raptor(Ser863)]和mTOR复合物1中的绑定蛋白（GβL）蛋白在组氨酸浓度为9.60 mmol/L时表达量最高。综合可知，组氨酸的添加可通过促进JAK2-STAT5信号通路中P-JAK2(Tyr1007/1008)和P-STAT5(Tyr694)蛋白的表达来进而调控β-酪蛋白表达。最适浓度（0.15~9.60 mmol/L）范围内的组氨酸还可通过mTORC1的P-raptor(Ser863)蛋白作用于下游靶点P-4EBP1(Thr37)来促进β-酪蛋白表达，最终调控乳蛋白合成。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 作为维持哺乳动物生命活动重要的“生物工厂”，乳腺利用从流经血液中摄取的氨基酸等营养物质为底物合成乳蛋白。研究证实，氨基酸还可作为一种信号因子，通过乳腺内多种信号级联传导通路，调控乳蛋白基因的转录及翻译过程，从而影响乳腺中乳蛋白的合成。酪氨酸蛋白激酶–信号转导子和转录激活子（JAK-STAT）信号通路和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路是乳蛋白基因转录和翻译过程中的主要调控路径。本文综述了乳腺JAK-STAT和mTOR信号通路的分子机制及氨基酸通过这些通路调控乳蛋白合成的研究进展，旨在进一步阐明氨基酸调控乳蛋白合成的作用机理。
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