• IR-3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞的建立

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的探讨3T3-L 1脂肪胰岛素抵抗细胞(insulin resistant 3T3-Ll adipocytes cell, IR-3T3-L1)最佳的建立条件。方法采用地塞米松(Dexamethason, DEX ) ,1一甲基一3一异丁基黄嚓岭(3-isobutyl-methylxanthine, IBMX)和不同浓度的胰岛素(10-8、10-7、10-6 mol·L-1)诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,Oil red O染色确定最佳胰岛素诱导浓度,继而用1 μmol·L-1DEX诱导建立IR-3T3-Ll脂肪胰岛素抵抗细胞。采用葡萄糖氧化酶一过氧化物酶(Glucose oxidase-peroxidase, GOD-POD)法对IR-3T3-L1细胞的最佳诱导时间(24-120 h)及其稳定时间(24-48 h )进行了考察。结果Oil red O染色发现3T3-L 1前脂肪细胞用DEX ,IB MX和10-6mol·L-'胰岛素诱导9 d,>90%的前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞;用1 μmol·L-' DEX培养%h后,脂肪细胞葡萄糖消耗率达到最大(P=0.0003 );稳定时间考察发现,在36 h内葡萄糖消耗与对照组比较有统计学意义(P<0.001)。结论3T3-L 1前脂肪细胞在1 μmol"L-1DEX,0.5 mmol·L-1IBMX和10-6 mol·L-1最佳胰岛素浓度作用下诱导分化为成熟的脂肪细胞后,用1 pmol·L-1DEX培养%h即可成功诱导成IR-3T3-L1-IR脂肪胰岛素抵抗细胞,且在36 h内稳定。