分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-16 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 纤维二糖可有效诱导丝状真菌产纤维素酶，前期研究表明匍枝根霉Rhizopus stolonifer TP-02具有纤维二糖合成酶（CBS），可以尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）为糖基供体合成纤维二糖，从而开启纤维素酶的自诱导合成途径。为研究R. stolonifer中纤维二糖的胞内合成途径，通过重叠PCR在GDP-葡糖焦磷酸化酶基因ggp中引入硫胺吡啶抗性基因ptrA，分别转化原菌TP-02和△ugp突变株，构建△ggp和△ugp/△ggp突变株。利用液质联用（LC-MS）检测突变株的胞内糖组分，发现ggp的缺失对胞内纤维二糖合成的影响较弱，而同时缺失ugp则将直接导致二糖合成受阻。RT-qPCR结果显示△ggp突变株中纤维素酶基因转录水平较原株TP-02下调20%左右，而△ugp/△ggp突变株中被测基因的转录水平则出现了高达80%左右的下调。同时对突变株纤维素酶表达水平进行研究，发现△ugp/△ggp突变株中几乎检测不到纤维素酶活力。结果显示，UDPG为R. stolonifer胞内合成纤维二糖的主要糖基供体，而GDPG可能是UDPG的替代物，在UDPG不足时维持胞内二糖合成。此外，利用生物信息学方法对CBS结构功能深入分析，经丙氨酸扫描确定其合成纤维二糖的关键作用残基为Asp210和Asp300，为后续进一步研究及理性改造提供方向和理论依据。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 聚唾液酸是一种由N-乙酰神经氨酸连接、电负性的线性同聚物，存在于人体、动物细胞和少数致病菌中，主要以糖蛋白（神经细胞粘附分子）和糖脂形式存在，是一种非糖胺聚糖（GAGs）、非免疫原性、生物可降解的优良生物材料。聚唾液酸可用作组织工程和药物缓释材料，也可以与其它大分子复合形成功能材料。本文对聚唾液酸生物学功能、发酵生产及应用进行概述，以期为聚唾液酸的进一步应用研究提供参考。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 聚唾液酸是一种由N-乙酰神经氨酸连接、电负性的线性同聚物，存在于人体、动物细胞和少数致病菌中，主要以糖蛋白（神经细胞粘附分子）和糖脂形式存在，是一种非糖胺聚糖（GAGs）、非免疫原性、生物可降解的优良生物材料。聚唾液酸可用作组织工程和药物缓释材料，也可以与其它大分子复合形成功能材料。本文对聚唾液酸生物学功能、发酵生产及应用进行概述，以期为聚唾液酸的进一步应用研究提供参考。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 摘要 目的：利用聚合物纳米胶束靶向输送光敏剂分子已经成为光动力治疗癌症的研究热点。方法：本研究采用原子转移自由基聚合反应合成嵌段聚合物聚丙烯酸叔丁酯?聚甲基丙烯酸缩水甘油酯（PtBA-b-PGMA），共聚物的一端脱除叔丁基，通过缩合反应共价键连接甘露糖分子，另一端环氧基开环引入叠氮基，并通过“click”反应共价连接氟硼二吡咯光敏剂分子，最后制备得到表面甘露糖修饰的负载光敏剂聚合物胶束。利用核磁共振氢谱仪和傅立叶变换红外光谱仪进行结构确认；通过透射电镜和动态光散射等考察其理化性质；经激光共聚焦显微镜和MTT细胞毒性实验对其甘露糖受体靶向性及光动力疗效进行考察和评价。结果：聚合物PtBA-b-PGMA的相对分子量为16924，其分散系数为1.36。聚合物中环氧基开环引入叠氮后在2106 cm-1处出现叠氮基特征峰。经过“click”反应引入氟硼二吡咯光敏剂分子后，叠氮基特征峰消失，在1637 cm-1处出现三氮唑特征峰。聚合物胶束粒径分布均一，稳定性良好。胶束平均流体力学直径为178 nm，在水溶液中粒度分布较窄（PDI=0.298）。聚合物胶束对人乳腺癌MDA-MB-231细胞和HEK293正常细胞均无暗毒性，在535 nm LED光照下对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有较好的光动力治疗效果。结论：聚合物胶束能被MDA-MB-231癌细胞表面高表达的甘露糖受体特异性识别，并被内吞进入癌细胞内，具有较好的光动力杀伤作用。
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