分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究白藜芦醇（RES）对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用，并探索其可能的作用机制。首先，用不同浓度（0、150、200、250、300 μmol/L）的过氧化氢（H2O2）处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h，确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度。用适宜浓度的H2O2建立氧化损伤细胞模型；然后，用不同浓度（0、2.5、5.0和10.0 μmol/L）的RES分别处理正常细胞和氧化损伤细胞24 h，确定RES安全浓度；最后，用安全浓度的RES处理氧化损伤细胞24 h。在整个培养过程中采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖情况；待安全浓度的RES处理氧化损伤细胞结束后采用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）探针法检测细胞中活性氧（ROS）的含量，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质印迹（Western blotting）法分别检测沉默调节蛋白1(SIRT1)/UCP2信号通路中关键因子SIRT1和UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量。结果表明：1）用浓度为150 μmol/L及以上的H2O2处理细胞8 h后，极显著降低细胞存活率（P0.05）；用2.5、5.0和10.0 μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后，细胞存活率均显著提高（P0.05）。因此，选用5.0 μmol/L为RES的安全浓度。3）用5.0 μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后，细胞中ROS的含量较极显著降低（P<0.01）；细胞中SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量极显著增加（P<0.01），而UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量则显著或极显著降低（P<0.01或P<0.05）。由此可见，适宜浓度的RES可激活SIRT1同时抑制UCP2的表达，UCP2通过负反馈调节方式减少细胞内ROS的生成，从而在一定程度上抑制TM3细胞的氧化损伤。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验以大肠杆菌型脂多糖(LPS)建立氧化应激模型，探讨了谷氨酰胺（GLN）对断奶仔猪氧化应激的影响。选用24头28日龄的健康三元（杜×长×大）断奶仔猪，随机分成3组，每组8个重复，每个重复1头猪。对照组和应激组饲喂基础饲粮，GLN组饲粮在基础饲粮中添加1% GLN，试验期为30 d。在试验第22、25、28和30天，应激组和GLN组仔猪分别按每千克体重腹腔注射100 μg LPS，对照组仔猪腹腔注射相同剂量的灭菌生理盐水，第30天进行前腔静脉采血并屠宰采取所需肠道样品，检测氧化应激相关指标。结果显示：1）LPS攻毒前各组血清抗氧化能力指标均无显著差异(P>0.05)。LPS攻毒后，应激组血清丙二醛(MDA)含量显著高于对照组(P<0.05)；GLN组血清MDA含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于应激组和对照组(P<0.05)。2）LPS攻毒后，在十二指肠黏膜中，GLN组过氧化氢酶（CAT）和锌铜超氧化物歧化酶(CuZuSOD)基因相对表达量显著高于应激组(P<0.05)。在空肠黏膜中，GLN组CAT、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)基因相对表达量显著高于对照组和应激组(P<0.05)，对照组GPX4基因相对表达量显著高于应激组(P<0.05)。在回肠黏膜中，GLN组和应激组CAT基因相对表达量显著低于对照组(P<0.05)，GPX4基因相对表达量显著高于对照组(P<0.05)；GLN组MnSOD基因相对表达量显著高于对照组和应激组(P<0.05)，CuZnSOD基因相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。结果表明，GLN在一定程度上可以缓解断奶仔猪因LPS引起的氧化应激，以期为实际生产中减少氧化应激提供一定的理论基础。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 印记基因在调控哺乳动物的众多生命进程中发挥着重要作用，尤其是在生命形成初期，印记基因通过表观遗传修饰决定等位基因的表达和沉默，调节着胚胎和胎盘的生长发育。印记基因在胎盘和胚胎中的表达紊乱与胎儿生长受限、发育停止以及甲状腺脱毒症等密切相关，因此深入探索印记基因对胚胎和胎盘发育的调节机理对于哺乳动物胎儿宫内发育迟缓、出生缺陷以及后期疾病的预防具有重要的指导意义。本文综述了印记基因的主要特点、性腺中印记的擦除、重建与表观遗传修饰及印记基因调控哺乳动物胚胎和胎盘发育的最新研究进展。
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