分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-11-05 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 糖工程是研究糖类物质的结构、功能、制备技术及其应用的一门学科。近30年，随着糖链功能研究技术手段的不断进步，大量的糖链结构及其生物学功能被阐明，糖链与生长、发育、疾病过程的密切关系被逐步揭示，以此为基础的糖生物工程的基础与应用研究蓬勃发展，已成为继基因工程、蛋白质工程之后，最为引人注目的新生物技术领域。当前国内外糖工程研究方兴未艾，对该领域的综述论文并不鲜见，但多侧重于对基础理论研究的讨论。本文着重介绍糖工程技术及产业化发展的状况，重点论述近年来我国糖工程的主要产品、市场状况、国内外研发动向及糖工程科技创新情况，并讨论了我国糖工程发展面临的机遇与挑战，为从事糖工程教学、科研及应用开发的广大学者、科研工作者及产业技术人员提供参考。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-08-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 优化并全合成里氏木霉几丁质酶基因，在毕赤酵母中实现分泌表达。产物几丁质酶的蛋白浓度达0.17 mg/mL，最适pH为5.6，最适温度为65 ℃，酶活为0.52 U/mL。该酶在50 ℃及以下较稳定。利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并对产物的组成及结构进行分析。超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（Ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry，UPLC-QTOF MS）检测及分析结果显示，酶解产物中包含至少41种聚合度2-18，不同脱乙酰度的壳寡糖组分；核磁共振（Nuclear magnetic resonance，NMR）检测及分析结果显示，产物壳寡糖的还原端主要为N-乙酰氨基葡萄糖，非还原端则同时含有N-乙酰氨基葡萄糖及氨基葡萄糖。相关结果可为壳寡糖的结构与功能关系研究提供参考。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-06-14 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 对来源于枯草芽孢杆菌菌株168（Bacillus subtilis 168）的壳聚糖酶编码基因进行了序列优化及全合成并在毕赤酵母（Pichia pastoris）中实现了分泌表达，表达产物的蛋白浓度达到0.30 mg/ml。表达的壳聚糖酶最适pH为5.6，最适温度为55 ℃，比酶活达84.54 U/ml。该酶在50 ℃及以下较稳定。利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（Ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry，UPLC-QTOF MS）对产物的组分进行了分离及鉴定。根据一级质谱信息，推测酶解产物中包含至少37种聚合度2-18，不同脱乙酰度的壳寡糖组分。综上，利用毕赤酵母分泌表达了来源于枯草芽孢杆菌菌株168的壳聚糖酶基因，利用表达产物水解制备了低脱乙酰度壳寡糖并对其组分进行了分析，可为后续壳寡糖结构与功能关系的研究提供参考。
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