• 丝胶蛋白通过自噬通路调控人胃癌MKN45细胞的增殖

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2018-06-15 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的:探索丝胶蛋白对胃癌MKN45细胞增殖活性的影响及作用机制。方法用LC3双荧光自噬病毒转染胃癌MKN45细胞,用嘌呤霉素筛选LC3双荧光自噬病毒的MKN45稳转株。实验分为3组,空白对照组(Blank)、丝胶蛋白阳性组(Sericin)、丝胶蛋白加自噬抑制剂组(Sericin+3-MA)。培育48 h后用cck-8试剂测定细胞增殖活性,根据所测数据得出丝胶蛋白半数致死浓度IC50,按此浓度处理细胞并培育48h,用流式细胞仪分别检测凋亡、周期,电镜检测细胞自噬,Western blotting检测LC3、p62、Beclin蛋白表达。将种植胃癌的裸鼠分为2组,即对照组(Saline)、丝胶蛋白阳性组(Sericin),每组5只;分别注射生理盐水和丝胶蛋白,测量肿瘤体积和质量。结果丝胶蛋白阳性组(Sericin)与空白对照组(Blank)相比,MKN45细胞增殖活性明显受到抑制,且细胞凋亡增加(P<0.01),细胞阻滞于G2/M期(P<0.01)。相对于空白组,丝胶蛋白处理后细胞在电镜观察到自噬小体明显增多;Western blotting检测到LC3-2 表达上调,Beclin表达增加,p62表达逐渐下调;丝胶蛋白加自噬抑制剂组(Sericin+3-MA)实验结果则介于两者之间。动物实验中,丝胶蛋白阳性组(Sericin)与对照组(Saline)相比,肿瘤体积和质量有显著下降。结论丝胶蛋白可通过调控胃癌MKN45细胞自噬影响细胞增殖活性。

  • 饮食习惯对广东地区孕妇血糖的影响

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的探索广东地区的饮食结构及特点与妊娠糖尿病发生的关系,帮助该地区育龄妇女选择有益于健康的行为和生活方式,从而降低孕期并发症的发生。方法采用食物频率调查问卷对57I名进行口服葡萄糖筛查试验(OGTT)的妊娠妇女进行饮食习惯及营养摄入情况调查。结果539名被调查对象(有效问卷539份),其中69名孕妇被诊断为妊娠糖尿病患者;470名为非妊娠糖尿病孕妇。与非妊娠糖尿病孕妇相比,妊娠糖尿病患者孕前体质指数明显增加,孕期体质量增长更多,且年龄更大,差异有统计学意义(P<0.05 )。与非妊娠糖尿病孕妇相比,妊娠糖尿病患者膳食纤维的摄入量较少,差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。两组孕妇高能量密度食物(广东特色点心)及高糖、高GI水果(广东热带水果)的摄入量差异明显,具有统计学意义(P<0.05 )。被调查539名孕妇的蛋白质和膳食纤维的日均摄入量明显低于中国居民孕中期妇女的推荐摄入量水平,差异有统计学意义(P<0.05)。多元回归方程分析妊娠糖尿病的相关危险因素显示,孕前体质指数较高、孕期体质量增长过多、糖尿病家族史、孕期摄入过多高密度能量食物和高糖、高GI水果均为妊娠糖尿病发生的危险因素。结论广东地区孕妇的膳食营养结构不合理,膳食摄入习惯与中国居民孕中期的膳食指南要求存在较大的差距。该地区人群喜食甜食和常选用广东特色食物,过多摄入广东甜点及高糖、高GI水果与妊娠糖尿病的发生有明显相关性。

  • CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制

    分类: 医学、药学 >> 基础医学 提交时间: 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》

    摘要: 目的检测CTHRCl在结直肠癌组织及细胞中的表达,探讨CTHRCI对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRCI在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达;将靶向作用于CTHRCI的shRNA和NC转染进LOVO细胞;CCK-8 ,Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。Western blotting检测转染后CTHRCI ,ERK1/2,P-ERK1/2,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin, β-catenin表达的变化。结果与正常豁膜组织相比,20例癌组织中的CTHRCl mRNA的平均表达量为0.0411±0.054,显著高于正常豁膜组织P=0.016,蛋白水平的结果与之一致;同时,CTHRCl在SW620和LOVO细胞里的表达(mRNA水平和蛋白水平)均显著高于HT29细胞株;较之对照组,CTHRCl敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,差异均具有统计学意义P<0.05。当CTHRCI在mRNA和蛋白水平的表达均被明显抑制时,总ERK 1 /2在保持基本不变的的前提下,P-ERK1/2明显降低,EMT出现逆转(即MET, E-cadherin升高,N-cadherin , Vimentin , β-catenin降低)。结论CTHRCl在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和LOVO中高表达。敲低CTHRCI抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。CTHRCl通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直肠癌的侵袭转移。