分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 研究神经生长因子前体（precursor of nerve growth factor, proNGF）促进乳腺癌细胞侵袭的作用与埃兹蛋白（ezrin）表达水平及其567位苏氨酸（Thr567）和477位酪氨酸（Tyr477）的磷酸化的相互关系。方法 用梯度浓度的proNGF（0、2.5、5和10 ng/mL）刺激人乳腺癌细胞系 MDA-MB-231和 MCF-7，用 Transwell侵袭实验检测 proNGF对 MDA-MB-231和 MCF-7侵袭的影响；用免疫印迹法检测 ezrin蛋白的表达水平，ezrin Thr567和 ezrin Tyr477磷酸化水平的变化；在 MDA- MB-231中转染pEnter-His-ezrinY477F质粒（ezrin显性负突变质粒），研究ezrin Tyr477磷酸化在proNGF促进乳腺癌细胞侵袭中的作用。结果proNGF以浓度依赖的方式促进 MDA-MB-231和 MCF-7的侵袭（P<0.05）；proNGF以浓度依赖和时间依赖的方式显著升高ezrin Tyr477磷酸化，而对ezrin蛋白的表达以及其Thr567磷酸化无明显影响；Src激酶特异抑制剂SKI-606显著抑制proNGF对ezrin Tyr477磷酸化的促进作用；转染pEnter-His-ezrinY477F抑制proNGF对MDA-MB-231细胞ezrin Tyr477磷酸化和侵袭能力的促进作用（P<0.05）。结论 ezrin Tyr477磷酸化在proNGF促进乳腺癌细胞侵袭中起关键作用；proNGF通过激活Src激酶使ezrin Tyr477发生磷酸化。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 研究Nanog促进乳腺癌细胞侵袭与ezrinT567磷酸化的关系及Nanog调节ezrinT567磷酸化的可能机制。方法 转染靶向Nanog的siRNA敲低乳腺癌细胞Nanog；用transwell法检测乳腺癌细胞侵袭；用免疫印迹检测乳腺癌细胞Nanog、PKCε表达水平和 ezrinT567磷酸化水平；用免疫共沉淀和免疫印迹检测 PKCε和 ezrin蛋白的相互作用。结果 敲低乳腺癌细胞的Nanog，PKCɛ蛋白表达下降、ezrinT567磷酸化水平下降、乳腺癌细胞的侵袭能力下降；敲低 PKCε降低 ezrinT567磷酸化水平；PKCɛ与 ezrin可免疫共沉淀。结论 Nanog可上调 PKCɛ的表达，后者可使ezrinT567磷酸化，这可能是 Nanog促进肿瘤转移的一个新机制。
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