利拉鲁肽通过PI3K/Akt 和MAPK/ERK通路促进心肌微血管内皮细胞的增殖和迁移

分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》

张颖 胡舜英 尹彤 田峰 王珊 张颖倩 陈韵岱

摘要： 目的 研究胰高血糖素样肽-1类似物利拉鲁肽对原代大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖和迁移的影响及其机制。方法 使用双酶消化法体外分离培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞，差速贴壁法进行纯化，CD31和Ⅷ因子抗体进行免疫细胞化学染色鉴定。采用不同浓度利拉鲁肽（0~1000 nmol/L）干预1代细胞，MTT绘制细胞生长曲线，Western blot检测利拉鲁肽对PI3K/Akt和MAPK/ERK通路的激活作用，BrdU荧光标记法和划痕实验观察药物作用下细胞增殖和迁移能力，并使用相应的通路阻断剂LY294002和PD98059来进一步证实。结果 体外分离原代CMECs，CD31及Ⅷ因子免疫荧光染色示双阳性率大于95%，MTT示细胞于种植48 h后进入对数生长期，利拉鲁肽以浓度依赖方式促进CMECs的体外增殖，100 nmol/L为其最适生长浓度（P<0.05）。予以100 nmol/L利拉鲁肽预干预细胞24 h后，Western blot显示胞内Akt和ERK磷酸化水平与正常细胞组相比有明显升高（P<0.05），加入相应通路阻断剂LY294002和PD98059，其磷酸化水平相较于利拉鲁肽组明显降低（P<0.05）。BrdU和划痕实验均说明利拉鲁肽能促进CMECs的增殖和迁移能力（P<0.05），使用LY294002和PD98059预处理后，增殖迁移能力均显著低于利拉鲁肽组（P<0.05）。 结论 利拉鲁肽是通过激活胞内PI3K/Akt和MAPK/ERK通路从而促进原代大鼠心肌微血管内皮细胞的增殖和迁移。

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