分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2018-06-15 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的:研究在肾脏高效导入目的基因miR-483-5p的方法。方法肾皮质注射miR-483-5p慢病毒：取35只C57BL/6J小鼠，随机分为空白对照组、慢病毒低剂量组（每侧肾皮质注射5 μL慢病毒）和慢病毒高剂量组（每侧肾皮质注射20 μL慢病毒），注射后7 d和21 d处死取材；构建可诱导全身过表达miR-483-5p的转基因小鼠；利用cre-loxp系统构建肾小管特异过表达miR-483-5p的转基因小鼠。3种模型小鼠利用全自动生化分析仪检测血清中尿素氮（BUN）水平判断肾功能，组织切片HE 染色观察肾脏组织结构，TUNEL法检测肾脏细胞凋亡。Real-time qPCR 检测miR-483-5p在肾脏的表达。结果3种过表达miR-483-5p小鼠肾功能均正常，肾脏组织结构无明显变化，肾脏细胞无凋亡。肾皮质注射20 μL LV3-miR-483-5p 后21 d表达最高（1.2±0.43 vs 8.6±1.09，P<0.001）。可诱导全身过表达miR-483-5p 的转基因动物在肾脏表达效率较低（0.9±0.09 vs 1.7±0.19，P<0.05），Creloxp 转基因小鼠可实现在肾脏特异性表达，且效率较高（1.6±1.13 vs 12.36±3.89，P<0.05）。结论首次构建肾小管特异过表达miR-483-5p的转基因小鼠模型，实现在肾小管特异高效表达，且不影响肾脏结构及功能，可以作为研究miR-483-5p在肾脏中的作用及其机制的良好模型；C57BL/6J小鼠每侧肾皮质注射20 μL LV3-miR-483-5p 后21 d过表达miR-483-5p效率较高，不影响肾功能，对肾组织无损伤，且模型构建时间较短，为miR-483-5p在肾脏中的作用及其机制研究提供良好的实验模型。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-27 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 分析二十二碳六烯酸（DHA）对黄曲霉素B1（AFB1）诱导的肝癌细胞侵袭能力影响。方法 不同浓度的AFB1、DHA/AFB1分别干预肝癌HepG2.2.15细胞，通过细胞划痕、迁移及侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力变化，流式细胞仪分析细胞周期比例，透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果 2 μmol/L AFB1与空白组相比，细胞划痕修复率增高，细胞穿膜细胞数目均增多，G0/G1期细胞比例明显下降，G2/M期细胞比例明显升高，S期细胞比例变化不明显；细胞多核仁，细胞内出现线粒体、高尔基体增多等。DHA/AFB1与单独AFB1处理组的相比，细胞划痕修复率降低；细胞穿膜细胞数目均减少，G0/G1期细胞比例明显升高，G2/M期细胞比例明显降低，S期细胞比例变化不明显；细胞单核仁，细胞内核质减少，细胞内线粒体减少，出现空泡化超微结构。结论 DHA可以明显抑制AFB1诱导增强的HepG2.2.15细胞迁移及侵袭能力。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2017-12-07 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 评估两种新型聚柠檬酸可降解生物材料诱导大鼠颅骨缺损后软组织再生的能力。方法 雄性Sprague Dawley大鼠46只，随机选取6只SD大鼠大腿肌肉分别植入材料，两周后取材；剩余40只颅骨缺损造模后随机分为４组：对照组，自体骨移植组和两种新型柠檬酸材料移植组，每组各10只，处理后3个月取材，行组织学染色及形态计量学分析。结果 1、两种新型聚柠檬酸生物材料可诱导肌肉内软组织再生；2、两种新型聚柠檬酸生物材料可诱导大鼠颅骨缺损时的血管与纤维组织再生；3、两种新型聚柠檬酸生物材料通过诱导软组织再生加速颅骨缺损后膜内成骨发生。结论 两种生物材料具有良好的软组织再生诱导性，可有效刺激颅骨缺损时软组织再生并同时加速颅骨膜内成骨的发生最终促进颅骨愈合。
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