不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18表达量影响

分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》

刘思乐 康劲翮 谭支良 王征

摘要： 本试验旨在研究不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18（CK18）表达量影响。采集42日龄山羊的瘤胃上皮组织，分别采用酶消化法和组织块法对其进行体外培养。通过光学显微镜观察原代培养和传代培养阶段的细胞形态，检测第5代山羊瘤胃上皮细胞的生长曲线，并采用细胞免疫荧光法对山羊瘤胃上皮细胞进行鉴定。结果显示，1）经0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸消化获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于2 d开始贴壁生长，5 d细胞开始明显增多，10 d细胞数量达到最大。2）经组织块法获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于4 d开始“爬出”组织块，8 d细胞开始明显增多，14 d细胞数量达到最大。3）经免疫荧光染色显示2种方法获得的细胞胞浆内CK18阳性表达且细胞纯度后者明显高于前者。4）组织块法获得的细胞CK18表达量显著高于酶消化法（P<0.05）。综合得出，与酶消化发相比，应用组织块法可成功获得纯度更高的山羊瘤胃上皮细胞。

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