用单性结实基因2A11-iaaM转化罗汉果的研究

分类： 生物学 >> 植物学 提交时间： 2018-03-28 合作期刊: 《广西植物》

周琼 胡姗姗 郝庆林 莫燕梅 李刚 唐美琼 辛佳佳 宁弋珍

摘要： 为实现罗汉果生产中免除人工授粉和果实无籽化，本试验利用pBI121-Gus，构建果实特异启动子2A11与生长素合成相关基因iaaM的嵌合基因（2A11-iaaM）过量表达载体；以罗汉果雌株叶盘为材料，采用农杆菌介导法，研究和建立罗汉果高效遗传转化体系，转化和创制单性结实罗汉果种质；并通过基因特异引物对的PCR扩增，初步检测出转基因阳性植株，将之移栽大田，观察转基因植株的单性结实性的表现。结果：成功构建了罗汉果单性结实性相关的pBAI-Gus植物双元表达载体；建立了农杆菌介导的罗汉果叶盘遗传转化优化体系，即农杆菌菌液OD600值为0.3~0.5，侵染10 min，最优选择培养基为MS+TDZ/0.7 mg•L-1+IBA/0.5 mg•L-1+Kan/5 mg•L-1+Cef/300 mg•L-1；经PCR鉴定共获得4株转基因阳性雌株；将阳性植株扩繁后移栽田间，经田间调查发现，24株阳性扩繁植株中有5株正常开花，占总植株数的20.8%，且其子房未经人工授粉发育成的幼果，表现单性结实性。本试验在载体构建和农杆菌介导的罗汉果遗传转化体系优化的基础上，将外源单性结实相关嵌合基因整合进罗汉果基因组并得到表达，为后续研究单性结实罗汉果的遗传生理，创制转基因罗汉果单性结实新种质，以及克服其产业化中需要人工授粉和无籽化提供了理论和应用基础。

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