分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究L-茶氨酸对过氧化氢（H2O2）诱导山羊瘤胃上皮细胞凋亡的保护作用。采集42日龄的湘东黑山羊的瘤胃组织进行原代细胞分离、培养、纯化。对照组采用完全培养基，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在完全培养基中添加800 µmol/L H2O2、4 mmol/L L-茶氨酸+800 µmol/L H2O2、8 mmol/L L-茶氨酸+800 µmol/L H2O2和16 mmol/L L-茶氨酸+800 µmol/L H2O2，每组3个重复。培养12 h后，采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活率，采用流式细胞术检测细胞周期，采用实时定量PCR法和蛋白质印迹（Western blot）法检测Bax和Bcl-2基因及其蛋白的表达。结果表明：L-茶氨酸能显著提高H2O2损伤的瘤胃上皮细胞存活率（P<0.05），显著增加S期细胞比例（P<0.05），显著降低Bax基因和蛋白表达量（P<0.05），显著提高Bcl-2基因和蛋白表达量（P<0.05），显著提高Bcl-2和Bax基因和蛋白表达量的比值（P<0.05）。结果提示，L-茶氨酸能通过抑制细胞凋亡来有效地保护由H2O2导致的瘤胃上皮细胞损伤；体外条件下，培养液中添加的L-茶氨酸浓度高于8 mm/L时能有效发挥抗凋亡作用。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本研究旨在评估化学计量学模型预测中国泌乳奶牛瘤胃挥发性脂肪酸（VFA）组成的精度，分析影响模型预测精度的原因。本研究选择了3个经典的奶牛瘤胃VFA模型，分别为MUR模型、DIJ模型和BAN模型。试验数据来自我国主要科研团队的18篇论文，包括14篇SCI、3篇中文核心期刊和1篇未见刊的英文文章，论文数据含动物饲粮、体重、干物质采食量、饲料添加剂、VFA各组分比例。采用预测误差均方(MSPE)和一致性相关系数(CCC)2种分析方法对3个经典的奶牛瘤胃VFA模型的估算精度进行评估分析。结果表明：BAN模型乙酸比例估算精度最高（决定系数=0.140，P=0.007），预测误差均方根为6.8%，误差主要来自整体偏差的偏离（47.8%）。3个模型无法预测丙酸、丁酸、其他酸比例。总之，BAN模型预测乙酸比例的精度是3个模型中最高的，但预测精度仍然偏低，误差来源于整体偏差的偏离，迫切需要利用更多数据建立适合我国国情的VFA化学计量学预测模
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验通过建立过氧化氢（H2O2）诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡模型，研究L-茶氨酸对H2O2诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡比率及其凋亡通路关键基因表达量的影响。选取42日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮传代细胞，培养于含5%胎牛血清（FBS）的DMEM/F12培养基中，待细胞密度达到60%～70%时，随机分为5组，分别为培养基中无额外添加物的对照组、添加800 µmol/L H2O2的Ⅰ组、添加800 µmol/L H2O2+4 mmol/L L-茶氨酸的Ⅱ组、添加800 µmol/L H2O2+8 mmol/L L-茶氨酸的Ⅲ组和添加800 µmol/L H2O2+16 mmol/L L-茶氨酸的Ⅳ组，每组3个重复。作用12 h后，应用流式细胞术（FCM）检测山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡比率，并采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）对山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡通路关键基因半胱氨酸天冬氨酸-3（Caspase-3）、半胱氨酸天冬氨酸-8（Caspase-8）、半胱氨酸天冬氨酸-9（Caspase-9）、Fas相关死亡域蛋白（FADD）和凋亡酶激活因子（Apaf-1）的表达量进行检测。结果显示：1）通过膜联蛋白-V（annexin V）/碘化丙啶（PI）联合染色结果可知，与Ⅰ组相比，各L-茶氨酸添加组（Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组）细胞晚期凋亡比率显著降低（P＜0.05），且细胞晚期凋亡比率随L-茶氨酸添加浓度的增加逐渐降低。2）通过PCR检测结果可知，与Ⅰ组相比，各L-茶氨酸添加组Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1基因的表达量皆显著降低（P＜0.05）。由此得出，L-茶氨酸对H2O2引起的山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡具有一定的保护作用，该结果可为今后研究反刍家畜瘤胃氧化应激损伤机制提供技术支持和理论参考。
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