分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-08-06 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 美国食品药品管理局批准了世界上第一个干细胞药物Prochymal。脐带间充质干细胞药物已被韩国食品药品管理局批准上市。脐带间充质干细胞制剂具有良好的临床应用前景，可用于治疗一些常规治疗手段无效或治疗效果不好的疾病，如系统性红斑狼疮、糖尿病、小儿自闭症、颅脑损伤、退行性关节炎以及膝关节软骨损伤等。脐带间充质干细胞制剂又称脐带间充质干细胞注射液，它的生产应遵循《药品生产质量管理规范》（GMP）的基本原则、相关规定和规范性文件以及其他一些要求，对生产流程的各个环节也有严格要求。脐带间充质干细胞制剂的生产流程包括脐带采集、分离纯化、干细胞鉴定、规模化扩增、注射液配制、分装、包装、贴标签等一系列步骤，最后生产出来的脐带间充质干细胞制剂产品需要保存在-196℃液氮中，使用前再进行复苏。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-08-06 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： R2R3-MYB类转录因子参与调控植物初生和次生代谢。本研究从中间锦鸡儿（Caragana intermedia）干旱转录组数据库中搜索并克隆了一个R2R3-MYB基因，命名为CiMYB15（GenBank登录号MH678649）；将CiMYB15基因编码区转入野生型拟南芥中，利用分光光度法测定了野生型和转基因拟南芥中总黄酮含量，并用qRT-PCR检测了转基因植物中AtCHS基因的表达情况。同时采用染色体步移法克隆了CiMYB15基因的启动子序列。结果表明：（1）CiMYB15基因gDNA长度为1960 bp，包含三个外显子（134、131和521 bp）和两个内含子（281和893 bp）；开放阅读框长度为786 bp，编码262个氨基酸。（2）克隆得到1580 bp的启动子序列，序列中主要包含损伤诱导元件G-box和P-box、盐诱导作用元件GT1-motif、参与干旱诱导的反应元件MBS，以及真菌侵害应答元件BOX-W1、植物-病原菌互作元件EIER；此外，还包含调节黄酮合成基因的MYB转录因子的结合位点。（3）CiMYB15基因的表达受到紫外胁迫的诱导。（4）CiMYB15基因过表达株系的总黄酮含量高于野生型。（5）过表达植物中AtCHS基因的表达量亦高于野生型。以上结果说明，CiMYB15基因正调控拟南芥黄酮代谢。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-08-06 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 以‘贵长’猕猴桃叶片为外植体，直接脱分化产生不定芽，并对不定芽增殖以及生根体系进行优化，建立了其高效直接再生体系。结果表明，叶片在MS+4.0 mg/L #31;6-BA+0.4 mg/L NAA培养基中，不定芽诱导率达95.8 %，平均出芽数达15.7个/叶片；不定芽在MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3培养基中，增殖率达100 %，且1～6代平均繁殖系数达8.15；不定芽先在添加1.0 mg/L IBA的1/2 MS固体培养基中诱导7 d，然后再先后在1/2 MS固体培养基和充分吸附1/2 MS培养液的珍珠岩中各培养14 d，生根率达98.61 %，且根系发育良好；50株试管苗移栽到以珍珠岩和田间土壤（其体积比为1:4）为基质的营养钵中，2周后成活49株，成活率达98 %。该研究成功建立了‘贵长’猕猴桃叶片高效再生体系，该方法不定芽诱导周期短，出芽率高且数目多，不定芽增殖系数大，生根率高且试管苗根系发达，为‘贵长’猕猴桃离体快速繁殖和遗传转化奠定了基础。
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