分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-02-11 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 该研究探究了JNK通路对M2巨噬细胞极化及M2介导的促肿瘤效应的影响。构建单核细胞THP1来源M2 巨噬细胞模型(THP1-M2) ，将细胞分为4 组: 用PMA 诱导的未活化巨噬细胞组( M0) ，用PMA，IL-4处理及阴性干扰（DMSO）的M2型巨噬细胞组( M2)，用特异性抑制剂阻断JNK通路的M2 型巨噬细胞组( M2-JNK I)。实时荧光定量PCR检测M2 表型marker基因的表达；免疫蛋白印迹法检测M2 表型marker蛋白水平；细胞划痕试验检测巨噬细胞迁移能力；流式细胞数检测786O及OSRC2凋亡。结果与THP1-M2组相比，阻断JNK通路的M2组M2表型marker表达明显下降，同时其细胞迁移能力也呈下降趋势。且阻断JNK通路后，M2巨噬细胞抑制肾癌细胞凋亡的能力减弱。该研究结果表明，抑制JNK通路后，M2巨噬细胞极化状态受损，其促肿瘤效应可转变为抗肿瘤效应。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-11 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 为初步探讨Herpud1在肾脏发育中的生物学作用，过表达Herpud1载体及敲低Herpud1载体被构建。载体被转染进后肾间充质细胞，通过RT-PCR和蛋白免疫印迹检测了上皮间质的转换过程(EMT)的标志蛋白E-钙粘蛋白(E-cadherin)，波形蛋白(Vimentin)，Snail蛋白及内质网应力的标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78），真核起始因子2α (eIF2α）的表达变化，通过EDU细胞增殖实验检测了Herpud1对细胞的增殖的作用，同时利用细胞划痕实验验证了细胞的迁移能力。结果显示，与空白对照组相比，在Herpud1过表达的实验组中，E-cadherin的表达在mRNA和蛋白水平均是降低的，而Snail和Vimentin的表达则是上升的，并伴随着细胞增殖活性的降低和细胞迁移能力增加，同时内质网应力相关蛋白GRP78和eIF2α是升高的。在Herpud1敲低的实验组，E-cadherin的表达在mRNA和蛋白水平均是升高的，而Snail和Vimentin的表达下降，细胞迁移能力是降低并且细胞增殖活性是升高的，同时内质网应力相关蛋白GRP78和eIF2α也是降低的。这些结果证明了Herpud1可以促进MK3细胞EMT过程，提高细胞的迁移能力，抑制细胞的增殖活性，其机制可能与细胞的内质网应力相关。
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