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  • 在酿酒酵母中研究人类mOGT基质导向序列的功能

    分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2018-12-16 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

    摘要: 人类线粒体N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(mitochondrial O-GlcNAc transferse, mOGT)通过其N端基质导向序列(matrix targeting sequence,MTS)定位于线粒体内膜上,mOGT的过表达将导致细胞的凋亡。蛋白质的O-GlcNAc修饰存在于绝大多数真核生物中,而酿酒酵母唯独缺乏该修饰途径。对人体mOGT过表达引起酿酒酵母生长缺陷的机理进行分析,期望利用该模型研究mOGT导致的细胞凋亡调控机制。在酿酒酵母细胞中表达人体mOGT及其截短序列发现:mOGT对酿酒酵母的生长抑制及细胞中的定位依赖于N端全长的MTS序列;MTS序列在酿酒酵母中共表达导致线粒体融合。MTS序列过表达的酿酒酵母菌可以作为研究mOGT引起细胞凋亡的模式细胞。

  • 共价连接BODIPY光敏剂的聚合物纳米胶束及其靶向光动力疗效的研究

    分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

    摘要: 摘要 目的:利用聚合物纳米胶束靶向输送光敏剂分子已经成为光动力治疗癌症的研究热点。方法:本研究采用原子转移自由基聚合反应合成嵌段聚合物聚丙烯酸叔丁酯?聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PtBA-b-PGMA),共聚物的一端脱除叔丁基,通过缩合反应共价键连接甘露糖分子,另一端环氧基开环引入叠氮基,并通过“click”反应共价连接氟硼二吡咯光敏剂分子,最后制备得到表面甘露糖修饰的负载光敏剂聚合物胶束。利用核磁共振氢谱仪和傅立叶变换红外光谱仪进行结构确认;通过透射电镜和动态光散射等考察其理化性质;经激光共聚焦显微镜和MTT细胞毒性实验对其甘露糖受体靶向性及光动力疗效进行考察和评价。结果:聚合物PtBA-b-PGMA的相对分子量为16924,其分散系数为1.36。聚合物中环氧基开环引入叠氮后在2106 cm-1处出现叠氮基特征峰。经过“click”反应引入氟硼二吡咯光敏剂分子后,叠氮基特征峰消失,在1637 cm-1处出现三氮唑特征峰。聚合物胶束粒径分布均一,稳定性良好。胶束平均流体力学直径为178 nm,在水溶液中粒度分布较窄(PDI=0.298)。聚合物胶束对人乳腺癌MDA-MB-231细胞和HEK293正常细胞均无暗毒性,在535 nm LED光照下对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有较好的光动力治疗效果。结论:聚合物胶束能被MDA-MB-231癌细胞表面高表达的甘露糖受体特异性识别,并被内吞进入癌细胞内,具有较好的光动力杀伤作用。