白花地胆草单体EM-12诱导2774-C10细胞G1/S期阻滞及细胞凋亡的分子机制研究

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

黄翔 杨杰 何佩彦 吴志慧 曾慧兰 王新宁** 蒋建伟

摘要： 目的:研究白花地胆草（Elephantopus mollis H.B.K）的乙醇提取物EM-12抗肿瘤作用分子机制。方法:MTT检测EM-12对卵巢癌细胞活性影响；克隆形成抑制实验检测EM-12对卵巢癌细胞增殖能力的影响; GSEA（Gene set enrichment analysis）分析EM-12对卵巢癌2774-C10细胞的影响; PI单染检测细胞周期; Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡; Western blotting检测细胞凋亡、周期相关蛋白。结果:MTT实验结果表明，EM-12可以显著抑制卵巢癌细胞的活性；RNA-seq及GSEA分析表明EM-12诱导2774-C10发生G1/S期阻滞；克隆形成抑制实验结果表明,EM-12可以显著抑制卵巢癌细胞的增殖；流式细胞术结果表明随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐增加,并且G1期细胞比例逐渐增加，S期细胞比例减少，发生G1/S期阻滞。Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加cyclin E2、Cyclin D1、CDK2、CDK6蛋白水平下降 ,并伴随caspase-8、Caspase-3活化及多聚ADP核糖聚合酶PARP酶切失活。 结论:EM-12诱导卵巢癌细胞发生G1/S期阻滞,且通过死亡受体通路诱导细胞凋亡。

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