分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2018-06-15 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的:探讨过表达脾酪氨酸激酶（SYK）对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及可能的相关机制。方法利用pcDNA.3.1质粒构建重组质粒pcDNA.3.1-SYK，转染结直肠癌细胞，过表达SYK，分组情况如下。（1）pcDNA.3.1-SYK（HCT116）：转染pcDNA.3.1-SYK 到HCT116；（2）pcDNA.3.1（HCT116）：转染pcDNA.3.1 空载体到HCT116 中；（3）Normal（HCT116）：正常HCT116 细胞。（1）pcDNA.3.1-SYK（Sw480）：转染pcDNA.3.1-SYK到Sw480；（2）pcDNA.3.1（Sw480）：转染pcDNA.3.1 空载体到Sw480中；（3）Normal（Sw480）：正常Sw480细胞。应用qRT-PCR法检测结直肠癌和癌旁组织中SYK和Fra-1的mRNA表达量；Western blot法检测SYK和Fra-1的蛋白表达量；MTT法检测细胞生长活力；BrdU方法检测细胞增殖活性；试剂盒方法检测Caspase-3的活性；Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡情况。结果SYK在结直肠癌组织和结直肠癌细胞系中的表达量均降低（P<0.01）；pcDNA.3.1-SYK转染结直肠癌细胞系，SYK的mRNA（P<0.01）和蛋白表达量显著升高（P<0.01），显示SYK过表达成功；SYK过表达后结直肠癌细胞生长活力和增值活性显著降低（P<0.01），细胞凋亡增加（P<0.01）；另外，SYK过表达后，Fra-1的表达量显著被抑制（P<0.01）。结论过表达SYK对结直肠癌细胞的增殖有抑制作用，并且促进结直肠癌细胞的凋亡，其机制有可能与SYK对Fra-1的调控有关，为结直肠癌的预防和治疗提供参考价值和理论基础。
分类： 医学、药学 >> 基础医学 提交时间： 2018-01-25 合作期刊: 《南方医科大学学报》
摘要： 目的 探讨过表达脾酪氨酸激酶（SYK）对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及可能的相关机制。方法 利用pcDNA.3.1质 粒构建重组质粒pcDNA.3.1-SYK，转染结直肠癌细胞，过表达SYK，分组情况如下。（1）pcDNA.3.1-SYK（HCT116）转染 pcDNA.3.1-SYK到HCT116；（2）pcDNA.3.1（HCT116）转染pcDNA.3.1空载体到HCT116中；（3）Normal（HCT116）正常 HCT116细胞。（1）pcDNA.3.1-SYK（Sw480）转染pcDNA.3.1-SYK到Sw480；（2）pcDNA.3.1（Sw480）转染pcDNA.3.1空载体 到Sw480中；（3）Normal（Sw480）正常Sw480细胞。应用qRT-PCR法检测结直肠癌和癌旁组织中SYK和Fra-1的mRNA表达 量；Western blot法检测SYK和Fra-1的蛋白表达量；MTT法检测细胞生长活力；BrdU方法检测细胞增殖活性；试剂盒方法检测 Caspase-3的活性；Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡情况。结果 SYK在结直肠癌组织和结直肠癌细胞系中的表达量均降低 （P<0.01）；pcDNA.3.1-SYK转染结直肠癌细胞系，SYK的mRNA（P<0.01）和蛋白表达量显著升高（P<0.01），显示SYK过表达成 功；SYK过表达后结直肠癌细胞生长活力和增值活性显著降低（P<0.01），细胞凋亡增加（P<0.01）；另外，SYK过表达后，Fra-1的 表达量显著被抑制（P<0.01）。结论 过表达SYK对结直肠癌细胞的增殖有抑制作用，并且促进结直肠癌细胞的凋亡，其机制有 可能与SYK对Fra-1的调控有关，为结直肠癌的预防和治疗提供参考价值和理论基础。
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