分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 百合作为无性繁殖的观赏花卉，种质改良备受世人关注，基因工程可作为改造百合性状的重要手段。为建立高效稳定的遗传转化体系，本文对百合组织培养的分化再生体系和外源基因的转化体系进行了探索。以百合地下茎鳞片为外植体，用不同配比的植物激素、蔗糖等进行正交试验，以期建立最适合鳞片的直接和间接再生体系；把含枸杞GR（Glutathione reductase）基因和筛选基因NPTII的载体，利用根癌农杆菌转化系统，分别对鳞片和愈伤组织等受体进行基因转化，并通过正交试验对转化条件进行优化，建立适合不同受体的遗传转化体系。结果表明：鳞片诱导和膨大的最优培养条件为MS+2mg/L 2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）+0.1mg/L NAA（萘乙酸）+ 90g/L蔗糖；鳞片直接分化最优培养条件为MS+1.0mg/L 6-BA（6-苄氨基嘌呤）+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖，鳞片间接分化的最优培养条件为MS+2.5mg/L 2,4-D +0.4mg/L TDZ（噻重氮苯基脲）+60g/L蔗糖；百合鳞片的卡那霉素（Kana）选择压为100 mg/L，愈伤组织为75mg/L；鳞片直接遗传转化的最优条件为农杆菌OD600=0.6，预培养3d，侵染40min，As（乙酰丁香酮）200μmol/L，阳性植株转化率为17.50%；鳞片分化愈伤组织遗传转化的最优条件为：农杆菌OD600，预培养5d，侵染40min，As 200μmol/L，阳性植株转化率为12.60%。结果显示，愈伤组织和鳞片均可作为百合遗传转化的受体。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 百合作为无性繁殖的观赏花卉，种质改良备受世人关注，基因工程可作为改造百合性状的重要手段。为建立高效稳定的遗传转化体系，本文对百合组织培养的分化再生体系和外源基因的转化体系进行了探索。以百合地下茎鳞片为外植体，用不同配比的植物激素、蔗糖等进行正交试验，以期建立最适合鳞片的直接和间接再生体系；把含枸杞GR（Glutathione reductase）基因和筛选基因NPTII的载体，利用根癌农杆菌转化系统，分别对鳞片和愈伤组织等受体进行基因转化，并通过正交试验对转化条件进行优化，建立适合不同受体的遗传转化体系。结果表明：鳞片诱导和膨大的最优培养条件为MS+2mg/L 2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）+0.1mg/L NAA（萘乙酸）+ 90g/L蔗糖；鳞片直接分化最优培养条件为MS+1.0mg/L 6-BA（6-苄氨基嘌呤）+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖，鳞片间接分化的最优培养条件为MS+2.5mg/L 2,4-D +0.4mg/L TDZ（噻重氮苯基脲）+60g/L蔗糖；百合鳞片的卡那霉素（Kana）选择压为100 mg/L，愈伤组织为75mg/L；鳞片直接遗传转化的最优条件为农杆菌OD600=0.6，预培养3d，侵染40min，As（乙酰丁香酮）200μmol/L，阳性植株转化率为17.50%；鳞片分化愈伤组织遗传转化的最优条件为：农杆菌OD600，预培养5d，侵染40min，As 200μmol/L，阳性植株转化率为12.60%。结果显示，愈伤组织和鳞片均可作为百合遗传转化的受体。
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