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1. chinaXiv:201712.00265 [pdf]

基于PEG6000富集精液来源外泌体的提取及鉴定

杨诚; 郭文彬; 张万松; 卞军; 杨建昆; 亓涛; 王春艳; 刘存东
Subjects: Medicine, Pharmacy >> Preclinical Medicine

目的 介绍PEG6000富集精液来源外泌体的提取和鉴定方法,为精液外泌体相关研究奠定基础。方法 选自南方医科大学南方医院检验中心6名正常志愿者精液,经8% PEG6000富集并多步离心结合超速离心方法获取提取物,然后采用透射电子显微镜观察其形态,纳米颗粒跟踪分析仪分析其大小,蛋白印迹法检测其蛋白组成成分。结果 提取物呈类圆形、椭圆形囊泡,质膜完整,大小约为30~150 nm,内部含有低电子密度物质,均阳性表达CD63、ALIX、TSG101蛋白,且不含精子细胞内质网Calnexin蛋白。结论 经过对提取物的形态、大小以及其蛋白成分分析证实所提取到的物质为精液来源的外泌体,为后续开展精液外泌体临床及基础研究提供了方法学基础。

submitted time 2017-12-21 From cooperative journals:《南方医科大学学报》 Hits521Downloads381 Comment 0

2. chinaXiv:201707.00706 [pdf]

抗埃博拉病毒核蛋白抗体的制备与双抗夹心ELISA检测方法的建立

刘俊伟; 常瑞恒; 回鹏; 董士尚; 王金凤; 孙波; 杨诚
Subjects: Biology >> Bioengineering

目的 制备抗埃博拉病毒核蛋白(EBOV NP)单克隆抗体和多克隆抗体,建立针对EBOV NP的ELISA检测方法。方法 以重组EBOV NP免疫动物并制备多克隆抗体和单克隆抗体。在此基础上,通过优化抗体浓度、包被液等条件建立检测EBOV NP的双抗夹心ELISA方法。结果 制备出了兔多克隆抗体,筛选出2株可分泌单克隆抗体的鼠源杂交瘤细胞株。Western Blot实验结果表明兔多抗与鼠单抗的结合区域均为N端1~35氨基酸。通过优化,建立了针对EBOV NP的双抗夹心ELISA检测方法。其线性范围是31.2 -1000 ng/mL,最低检测限为2.6 ng/mL。结论 制备出了抗EBOV核蛋白的高特异性多克隆抗体和单克隆抗体,建立了定量检测EBOV核蛋白的方法。

submitted time 2017-07-24 From cooperative journals:《中国生物工程杂志》 Hits1587Downloads756 Comment 0

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