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1. chinaXiv:202001.00085 [pdf]

水曲柳FmPHV 基因克隆及在形成层愈伤组织中的表达分析

张佳薇; 张旭;  肖英; 韩朝君; 刘华领; 张振峰; 梁楠松;  詹亚光
Subjects: Biology >> Botany >> Applied botany

植物PHAVOLUTA(PHV)转录因子是HD-ZIPIII 家族的重要成员之一,在茎尖分生组织形成和胚芽形成过程中起着重要调控作用。本研究通过基因克隆获得了水曲柳PHV 基因,并命名为FmPHV。生物信息学分析表明,水曲柳FmPHV 基因编码区全长为2 112 bp,包含有一个完整的开放阅读框,其编码了一个由703 个氨基酸组成的蛋白。亚细胞定位预测其主要存在于叶绿体中,为稳定亲水蛋白。保守域及同源分析表明,FmPHV 与油橄榄、芝麻和烟草等物种的同源蛋白保守结构域同源性高达99 %。我们在低温4 °C 条件下,使用50 mg•L-1 吲哚丁酸(IBA)溶液对水曲柳树皮进行处理,获得了水曲柳形成层细胞,并进一步诱导获得形成层愈伤组织。对FmPHV 基因的时空表达模式进行分析表明,FmPHV 基因六月份表达量最高,同时,FmPHV 能够在芽中高表达,树皮获得的不同来源的愈伤组织相互比较,FmPHV 在来源为形成层分生组织形成层愈伤组织中的表达量显著高于其在其他来源的愈伤组织中的表达。此外,我们对水曲柳幼苗瞬时过表达FmPHV 基因,对其所在通路关键基因的表达特征进行分析。FmPHV 瞬时过表达后,生长素相关基因表达下降,细胞分裂素相关基因表达上升,更利于芽的分化。本文揭示了水曲柳FmPHV在水曲柳植株生长过程中的表达模式以及FmPHV 过表达对芽再生通路各关键基因的调控情况,为研究水曲柳中FmPHV 调控生长发育的分子机制以及其在生长素和细胞分裂素响应通路中发挥的作用奠定基础。

submitted time 2020-01-12 From cooperative journals:《广西植物》 Hits226Downloads128 Comment 0

2. chinaXiv:201908.00077 [pdf]

FmJAZ1基因瞬时侵染水曲柳对JA通路相关基因表达的影响

杨少彤;  刘宗林;  屈申;  于磊;  詹亚光
Subjects: Biology >> Botany >> Applied botany

该文将对水曲柳中JAZ蛋白家族的一员FmJAZ1的功能及对其上下游基因影响进行初步分析。首先利用无缝克隆的方法构建FmJAZ1-pROK2-GUS 过表达载体,利用三亲杂交的方法将载体转入农杆菌,随后使用农杆菌对水曲柳组培苗进行瞬时侵染,得到FmJAZ1过表达的侵染苗。最后在侵染后36 h使用DIECA(茉莉酸合成途径抑制剂)对侵染苗进行处理,分别取0、1、3、6、18、21、24 h七个时间点的样品,通过荧光定量PCR对FmJAZ1、JAZ2、GL1、EIN3、MYC2五个基因的表达进行分析。农杆菌瞬时侵染水曲柳幼苗后,FmJAZ1表达显著升高,为空载侵染的3.2倍,说明FmJAZ1瞬时转入水曲柳并完成基因表达,侵染有效。经过DIECA(茉莉酸合成途径抑制剂)处理的侵染苗FmJAZ1的相对表达量初期下降并出现明显波动,18 h后恢复平稳,证明它是JA通路的作用基因。同时检测了四个JA通路相关基因的表达,在1 h时JAZ2、GL1表达下调,其余均有轻微上调,随后各基因表达均呈上调。FmJAZ1瞬时转化水曲柳后FmJAZ1过表达,说明瞬时侵染有效;DIECA处理后FmJAZ1表达显著下调说明FmJAZ1的合成受JA调控。在水曲柳中FmJAZ1抑制转录因子GL1、EIN3、MYC2、FmJAZ2的表达,且FmJAZ2的合成也受JA调控。

submitted time 2019-08-27 From cooperative journals:《广西植物》 Hits3987Downloads224 Comment 0

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