“介导两种半纤维素酶分泌表达的信号肽比较”

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

杨青 汪斌 王亚伟 张华山 熊海容 张莉

摘要： 木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶，广泛应用于诸多领域。本研究选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1，以α-factor为参照，分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶ManA，选择适合DSB和ManA表达的信号肽以提高胞外酶活水平。结果表明不同信号肽引导的两种半纤维素酶的酶活水平相差较大：对DSB（分子量为23 KDa），α-factor介导的表达效率明显优于其它3种信号肽；但对ManA（分子量为30 KDa），Dse4和α-factor介导的表达效率相当且明显优于Scw11和Exg1。因此在X33中表达DSB时应选用α-factor，而表达ManA时应选用Dse4或α-factor。此外胞内酶活的结果显示α-factor介导的DSB和ManA重组菌胞内滞留酶活明显高于其它信号肽，而分子量为30 KDa的ManA的滞留酶活又明显高于分子量为23 KDa的DSB，因此在表达ManA蛋白时，选用其它的信号肽，如Dse4，会减少外源蛋白在胞内的滞留从而在一定程度上提高外源蛋白的分泌量。本研究为毕赤酵母表达系统鉴定更多可用的信号肽并筛选到针对目的蛋白的最优信号肽奠定了一定的基础。

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