融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析

摘要: 人核糖核酸酶抑制因子 (human ribonuclease inhibitor, hRI) 是一种能够调节核糖核酸酶活性的酸性包浆蛋白。通过构建含SUMO、IF2、GST、NusA 、MsyB、Trx和 MBP融合标签的重组表达载体，以大肠杆菌BL21（DE3）作为宿主菌进行自诱导（auto-induction，AI）表达，从而使 hRI 的表达量得以提升。利用MagNi磁珠纯化及电泳分析hRI的表达状况，通过RNase/Sepharose亲和层析获得纯度较高的蛋白。纯化后获得的融合蛋白浓度为2960.513 mg/L，与其它公司的hRI活性进行比较，检测其酶活性约为50 U/μL，并使其成功用于RNA的保护，为NusA-hRI的应用提供理论依据。