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人组氨酸磷酸酶蛋白PHPT1的细胞定位及其对细胞层状伪足形成的影响

内容摘要

目的:获取人组氨酸磷酸酶蛋白PHPT1基因,并构建其C端GFP融合的真核表达载体,通过瞬时转染观察融合蛋白在细胞内的表达和定位,并研究其定位与细胞层状伪足形成的关系。方法:以人人宫颈癌细胞株HeLa cDAN为模板,PCR扩增PHPT1的全长编码基因,分别克隆到pEGFP-N2载体中,构建pEGFP-N2-PHPT1真核表达载体,利用脂质体将构建的载体转染到HeLa细胞中,用激光共聚焦扫描显微镜观察N端GFP连接的PHPT1的细胞定位,并进一步探讨其定位与细胞层状伪足形成的关系。结果:成功构建了PHPT1的GFP融合表达载体pEGFP-N2-PHPT1,并在HeLa细胞中分别检测到了融合蛋白的表达,发现其定位与细胞层状伪足的形成密切相关。结论:GFP融合形式表达的PHPT1蛋白在细胞质和细胞核中均有表达,并且其可定位于细胞层状伪足的前沿,影响细胞层状伪足的形成。
点击下载全文 评论 来自合作期刊:《中国生物工程杂志》 点击量:7544 下载量:293
推荐引用方式: 徐安健,李艳萌,李斯文,乌姗娜,张蓓,黄坚.(2017).人组氨酸磷酸酶蛋白PHPT1的细胞定位及其对细胞层状伪足形成的影响.中国生物工程杂志.doi:10.12074/201706.00280 (点此复制)
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[V1] 2017-06-01 15:47:36 chinaXiv:201706.00280V1 下载全文
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